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典型文献
靶向催乳素受体的嵌合抗原受体T细胞制备条件的优化
文献摘要:
嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞疗法已成为恶性肿瘤治疗领域内的研究重点,催乳素受体(PRLR)也被证明其过表达会影响乳腺癌的发生与发展,是乳腺癌治疗的潜在靶点.本研究建立了三质粒系统[pHIV-绿色荧光蛋白(GFP)、psPAX2、pVSVG]包装慢病毒,并将其应用于新构建的靶向PRLR的CAR慢病毒表达载体,通过进一步优化慢病毒制备条件,测定慢病毒滴度,成功构建了靶向PRLR的CAR-T细胞.结果表明,制备慢病毒的最优条件为:PRLR-CAR ∶ psPAX2 ∶ pVSVG质量比为3 ∶ 2 ∶ 1,且和转染试剂以质量比1 ∶ 2混合,经浓缩后滴度可达到1.88×107 TU/ml.以此慢病毒感染人T细胞,并经终浓度0.5 μg/ml嘌呤霉素筛选2d后可得到CD4阳性表达率约为55%,CD8阳性表达率约为35%的CAR-T细胞,且PRLR-CAR阳性表达率大于50%.构建的新型靶向PRLR的CAR-T细胞可为乳腺癌的免疫治疗提供参考.
文献关键词:
乳腺癌;催乳素受体;嵌合抗原受体;T淋巴细胞;慢病毒
作者姓名:
徐晨宵;朱建伟;张宝红
作者机构:
上海交通大学药学院,细胞工程及抗体药物教育部工程研究中心,上海200240
引用格式:
[1]徐晨宵;朱建伟;张宝红-.靶向催乳素受体的嵌合抗原受体T细胞制备条件的优化)[J].中国医药工业杂志,2022(04):491-499
A类:
pHIV,pVSVG
B类:
催乳素受体,嵌合抗原受体,制备条件,CAR,细胞疗法,恶性肿瘤治疗,PRLR,过表达,发生与发展,乳腺癌治疗,潜在靶点,质粒,绿色荧光蛋白,GFP,psPAX2,慢病毒表达载体,病毒滴度,最优条件,转染,TU,ml,慢病毒感染,嘌呤霉素,2d,CD4,阳性表达率,CD8,免疫治疗
AB值:
0.228475
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