目的:探讨在乳腺癌细胞中高表达的N-乙酰转移酶10(NAT10)引起对铂类抗肿瘤药的耐药效应，并揭示其潜在机制。方法:实验分为野生型组(MCF-7野生型细胞未经任何处理)、NAT10过表达组(h-NAT10质粒转染至MCF-7细胞)和NAT10敲低组(sh-NAT10质粒转染至MCF-7细胞)。采用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力，采用免疫共沉淀实验检测NAT10与多聚ADP核糖转移酶1(PARP1)的相互作用，并检测过表达或敲低NAT10的表达对PARP1乙酰化水平和半衰期的影响，通过免疫组化染色和免疫沉淀实验检测乙酰化的PARP1招募相关DNA损伤修复相关蛋白的情况，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:Transwell实验显示，NAT10过表达组细胞侵袭数为(483.00±46.90)个，NAT10敲低组细胞侵袭数为(469.00±40.50)个，与MCF-7野生型细胞[(445.00±35.50)个]比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。在10 μmol/L奥沙利铂作用下，NAT10过表达组细胞侵袭数为(502.00±45.60)个，NAT10敲低组细胞侵袭数为(105.00±20.50)个，与野生型细胞[(219.00±31.50)个]比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在10 μmol/L奥沙利铂作用下，与野生型细胞比较，NAT10过表达可以增强PARP1与NAT10的结合，而使用NAT10抑制剂Remodelin则抑制了二者的相互结合。高表达NAT10诱导PARP1乙酰化后，PARP1与X射线修复交叉互补蛋白1(XRCC1)的结合增加，敲低NAT10的表达后，降低了PARP1和XRCC1的结合。高表达NAT10增强了PARP1与DNA连接酶3(LIG3)的结合，而敲低NAT10的表达则会降低PARP1与LIG3的结合。在10 μmol/L奥沙利铂处理后的细胞中，NAT10过表达细胞中γH2AX表达水平为0.38±0.02, NAT10敲低细胞中γH2AX表达水平为1.36±0.15，与野生型细胞(1.00±0.00)比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在10 μmol/L奥沙利铂处理后的细胞中，NAT10过表达组细胞凋亡率为(6.54±0.68)%，NAT10敲低组细胞凋亡率为(12.98±2.54)%，与野生型细胞[(9.67±0.37)%]比较，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:NAT10高表达增强了NAT10与PARP1的结合，并促进PARP1的乙酰化，进而延长了PARP1的半衰期，从而增强PARP1招募DNA损伤修复相关蛋白到损伤位点，促进DNA损伤修复，最终使乳腺癌细胞存活。

乳腺肿瘤;N-乙酰转移酶10;多聚ADP核糖转移酶1

齐攀;陈雅珂;崔瑞丽;衡瑞娟;徐升;和小颖;岳爱民;康江坤;李昊翰;朱永鑫;王聪;陈雨璐;胡姱;尹延彦;宣立学;宋宇

新乡市中心医院头颈乳腺科　新乡医学院第四临床学院，新乡　453000;新乡医学院药学院，新乡　453000;国家癌症中心　国家肿瘤临床医学研究中心　中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院乳腺科，北京　100021

中华肿瘤杂志

[1]齐攀;陈雅珂;崔瑞丽;衡瑞娟;徐升;和小颖;岳爱民;康江坤;李昊翰;朱永鑫;王聪;陈雨璐;胡姱;尹延彦;宣立学;宋宇-.乳腺癌细胞N-乙酰转移酶10高表达诱导铂类药物耐药的作用机制)[J].中华肿瘤杂志,2022(06):540-549

Remodelin,LIG3

乳腺癌细胞,转移酶,铂类药物,药物耐药,NAT10,抗肿瘤药,药效,潜在机制,野生型,MCF,过表达,质粒转染,敲低,sh,Transwell,实验检测,侵袭能力,免疫共沉淀,多聚,ADP,核糖,PARP1,乙酰化,半衰期,免疫组化染色,免疫沉淀,招募,损伤修复,复相,流式细胞术,细胞侵袭,奥沙利铂,相互结合,复交,XRCC1,连接酶,H2AX,细胞凋亡率,而延,终使,细胞存活,乳腺肿瘤

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