典型文献
微小RNA-4318靶向调控外被体蛋白复合物亚基β’在前列腺癌迁移、侵袭转移中的作用
文献摘要:
目的:探讨微小RNA-4318(miR-4318)靶向调控外被体蛋白复合物亚基β’(COPB2)在前列腺癌侵袭转移中的作用机制。方法:通过Target Scan Human 7.0数据库预测COPB2 3’非编码区(3’UTR)可能结合的miRNA,双荧光素酶报告基因验证miR-4318与COPB2的靶向关系。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测转染mimics及inhibitors后的蛋白及RNA表达量,通过Transwell法检测细胞的侵袭和迁移能力。组间比较采用独立样本
t检验。
结果:Target Scan Human 7.0数据库预测COPB2 3’UTR区可能结合的miRNAs,结果显示miR-4318结合可能性最大。通过临床15对前列腺癌与癌旁组织中miRNAs的表达量比对,结果发现上述3种miRNAs中只有miR-4318在大部分癌组织中表达(10.18±9.32)低于癌旁组织(21.46±36.19)。双荧光素酶报告结果表明,对比mimic-NC和WT-COPB2共转染比较双荧光素酶相对活性(2.31±0.02),miR-4318和WT-COPB2共转染明显降低DU145细胞的双荧光素酶相对活性(0.38±0.12),差异有统计学意义(
t=92.870,
P<0.05)。RT-qPCR结果显示,在PC3、DU145细胞中转染miR-4318 mimics后,miR-4318的表达水平(3.94±0.34、2.42±0.33)显著高于mimic-NC组(1.09±0.07、0.97±0.05),差异有统计学意义(
t=11.630、6.157,
P<0.05);转染miR-4318 inhibitors(0.26±0.02、0.30±0.06)后,miR-4318的表达水平显著低于inhibitor-NC组(0.89±0.10、1.28±0.05),差异有统计学意义(
t=8.768、18.550,
P<0.05)。Western blot结果表明,在PC3、DU145细胞中miR-4318 mimics组和mimic-NC组表达量分别为(0.12±0.01、0.14±0.01),(0.30±0.02、0.30±0.02),miR-4318 mimics组明显低于NC组,上调miR-4318明显降低了COPB2的表达量,差异有统计学意义(
t=14.020、12.310,
P<0.05)。miR-4318 inhibitors组(0.35±0.02、0.59±0.04)的表达量与inhibitor-NC组(0.31±0.02、0.29±0.02)比较,差异有统计学意义(
t=1.893、2.919,
P<0.05)。Transwell实验结果显示,miR-4318 mimics组的PC3、DU145细胞迁移数分别为(19.15±0.98)、(28.60±3.23)个,显著低于mimic-NC组[(31.90±2.54)、(44.77±1.94)个],差异有统计学意义(
t=6.630、6.069,
P<0.05),上调miR-4318能够抑制PC3、DU145细胞迁移能力。与inhibitor-NC组[(37.14±1.92)、(38.91±2.45)个]比较,miR-4318 inhibitors组的PC3、DU145细胞迁移数[(41.65±0.75)、(53.04±2.80)个]较高,差异有统计学意义(
t=3.081、2.900,
P<0.05)。miR-4318 mimics组和mimic-NC组的PC3、DU145细胞侵袭数分别为(16.51±1.21)、(19.49±2.29)个和(24.50±2.60)、(25.14±1.53)个,miR-4318 mimics组明显低于mimic-NC组,差异有统计学意义(
t=3.391、5.371,
P<0.05)。miR-4318 inhibitors组的PC3、DU145细胞侵袭数[(33.80±4.43)、(30.21±1.27)个]显著高于inhibitor-NC组[(24.72±0.10)、(26.29±0.88)个],差异有统计学意义(
t=2.282、3.583,
P<0.05)。
结论:miR-4318能够靶向调控COPB2表达,抑制前列腺癌细胞的侵袭和迁移能力。
文献关键词:
前列腺癌;微小RNA;侵袭;迁移
中图分类号:
作者姓名:
冯岩岩;潘海燕;万宏源;吴升;孙健;陈雪芬;糜远源;祝黎洁
作者机构:
江南大学无锡医学院 214122;江南大学附属医院泌尿外科,无锡 214122;江南大学附属医院盆底康复中心,无锡 214122
文献出处:
引用格式:
[1]冯岩岩;潘海燕;万宏源;吴升;孙健;陈雪芬;糜远源;祝黎洁-.微小RNA-4318靶向调控外被体蛋白复合物亚基β’在前列腺癌迁移、侵袭转移中的作用)[J].中华实验外科杂志,2022(05):970-974
A类:
B类:
靶向调控,复合物,亚基,侵袭转移,COPB2,Target,Scan,Human,非编码区,UTR,双荧光素酶报告基因,实时定量,反转录聚合酶链反应,qPCR,蛋白印迹法,blot,mimics,inhibitors,白及,Transwell,侵袭和迁移,miRNAs,癌与癌旁组织,癌组织,组织中表达,NC,WT,共转染,DU145,PC3,迁移数,细胞迁移能力,细胞侵袭,前列腺癌细胞
AB值:
0.161906
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