典型文献
LncRNA ZFAS1影响骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的机制研究
文献摘要:
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)锌指蛋白反义链1(ZFAS1)在骨关节炎(OA)中的作用及其潜在分子机制.方法 将于恩施州中心医院进行膝关节置换术的OA患者软骨组织样本作为OA组,将同期外伤急诊截肢患者的正常膝关节组织样本作为对照(Control)组,RT-qPCR实验检测OA软骨组织中lncRNA ZFAS1和miR-590的表达.将Vector和pcDNA-ZFAS1转染到原代软骨细胞后,MTT实验和流式细胞术分别检测OA软骨细胞增殖和凋亡情况.双荧光素酶报告基因实验分别验证ZFAS1和miR-590以及miR-590和转化生长因子-β受体2(TGFβR2)的靶向关系.将miR-590 mimic或NC mimic与Vector和pcDNA-ZFAS1共转染到原代软骨细胞,检测细胞增殖和凋亡,RT-qPCR实验检测软骨细胞中TGFβR2 mRNA表达水平,Western blot检测软骨细胞中TGFβR2蛋白的表达.结果 与Control组比较,OA组软骨组织中的lncRNA ZFAS1表达显著下调(P<0.05),miR-590表达显著上调(P<0.05).与Vector组比较,pcDNA-ZFAS1组软骨细胞中lncRNA ZFAS1表达水平显著升高,miR-590表达水平显著降低,软骨细胞增殖能力增强,细胞凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05).MiR-590与ZFAS1存在互补的结合位点,TGFβR2与miR-590也存在互补的结合位点.与NC mimic组比较,miR-590 mimic和3'UTR-ZFAS1-WT共转染组的细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而miR-590 mimic和3'UTR-ZFAS1-MUT共转染组的细胞荧光素酶活性无统计学差异(P>0.05).此外,与NC mimic组比较,miR-590 mimic和3'UTR-TGFβR2-WT共转染组的细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05).与NC mimic组比较,miR-590 mimic组细胞中TGFβR2 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).与pcDNA-ZFAS1+NC mimic组比较,pcDNA-ZFAS1+miR-590 mimic组软骨细胞中miR-590表达水平显著升高,软骨细胞增殖能力减弱,细胞凋亡率升高,TGFβR2 mRNA和蛋白的表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 LncRNA ZFAS1通过调控miR-590/TGFβR2轴促进OA中软骨细胞增殖,并抑制细胞凋亡.
文献关键词:
骨关节炎;软骨细胞;lncRNA ZFAS1;凋亡;增殖
中图分类号:
作者姓名:
吴昊;黄震;李磊
作者机构:
恩施州中心医院关节外科,湖北恩施445000;恩施慧宜中西医结合风湿医院骨与关节外科,湖北恩施445000
文献出处:
引用格式:
[1]吴昊;黄震;李磊-.LncRNA ZFAS1影响骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的机制研究)[J].局解手术学杂志,2022(12):1039-1045
A类:
ZFAS1+NC
B类:
LncRNA,骨关节炎,软骨细胞,增殖和凋亡,长链非编码,lncRNA,锌指蛋白,反义,OA,恩施州,中心医院,膝关节置换术,软骨组织,外伤,急诊,截肢,Control,qPCR,实验检测,Vector,pcDNA,原代,MTT,流式细胞术,双荧光素酶报告基因实验,转化生长因子,TGF,mimic,共转染,blot,细胞增殖能力,细胞凋亡率,MiR,结合位点,UTR,WT,荧光素酶活性,MUT,统计学差异,蛋白表达水平,ZFAS1+miR,中软
AB值:
0.156238
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