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胆碱能抗炎通路在Ghrelin调控脓毒症大鼠小肠上皮PepT1表达中的作用
文献摘要：
目的:探讨胆碱能抗炎通路在脑肠肽Ghrelin调控脓毒症大鼠小肠上皮靶向寡肽转运体1（PepT1）表达中的作用。方法:将100只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、脓毒症组、脓毒症+迷走神经离断组、脓毒症+Ghrelin组、脓毒症+迷走神经离断+Ghrelin组，每组20只。假手术组大鼠开腹后仅分离盲肠，不结扎和穿孔；脓毒症组大鼠行盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症动物模型；脓毒症+迷走神经离断组大鼠CLP的同时行迷走神经离断术；脓毒症+Ghrelin组大鼠行CLP制模后立即静脉注射Ghrelin 100 μmol/L；脓毒症+迷走神经离断+Ghrelin组大鼠行CLP和迷走神经离断术后立即静脉注射Ghrelin，给予剂量及方法同脓毒症+Ghrelin组。各组取10只大鼠观察术后7 d生存情况。各组其余10只大鼠于术后20 h处死取静脉血和小肠组织，观察腹腔肠道情况，透射电镜下观察小肠上皮细胞损伤情况，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清及小肠组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量；制备小肠黏膜刷状缘囊泡（BBMV），采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）及蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测小肠上皮PepT1的mRNA和蛋白表达。结果:假手术组术后7 d大鼠全部生存；脓毒症组大鼠7 d累积生存率明显低于假手术组（20%比100%，
P<0.05）；Ghrelin干预后可改善大鼠累积生存率（与脓毒症比较：40%比20%，
P<0.05），但迷走神经离断后则减弱了Ghrelin的保护作用（与脓毒症+Ghrelin组比较：10%比40%，
P<0.05）。与假手术组比较，脓毒症组大鼠小肠和盲肠呈暗红色，肠管肿胀积气，透射电镜下可见小肠上皮细胞损伤严重，血清及小肠组织TNF-α、IL-1β含量明显升高，小肠上皮PepT1的mRNA和蛋白表达水平均明显下降，说明脓毒症大鼠模型制备成功。脓毒症大鼠迷走神经离断后肠管肿胀积气情况加重，导致大鼠全部死亡。与脓毒症组比较，脓毒症+Ghrelin组大鼠腹腔情况明显好转，透射电镜下可见小肠上皮细胞损伤明显减轻，血清及小肠组织TNF-α、IL-1β含量明显下降〔血清TNF-α（ng/L）：253.27±23.32比287.90±19.48，小肠组织TNF-α（ng/L）：95.27±11.47比153.89±18.15，血清IL-1β（ng/L）：39.16±4.47比54.26±7.27，小肠组织IL-1β（ng/L）：28.47±4.13比42.26±2.59，均
P<0.05〕，小肠上皮PepT1 mRNA和蛋白表达水平明显上调〔PepT1 mRNA（2
-ΔΔCt）：0.66±0.05比0.53±0.06，PepT1蛋白（PepT1/GAPDH）：0.80±0.04比0.60±0.05，均
P<0.05〕；与脓毒症+Ghrelin组比较，脓毒症+迷走神经离断+Ghrelin组实施迷走神经阻断后，Ghrelin减轻脓毒症大鼠炎症因子释放的作用明显减弱〔血清TNF-α（ng/L）：276.58±19.88比253.27±23.32，小肠组织TNF-α（ng/L）：144.28±12.99比95.27±11.47，血清IL-1β（ng/L）：48.15±3.21比39.16±4.47，小肠组织IL-1β（ng/L）：38.75±4.49比28.47±4.13，均
P<0.05〕，失去了对小肠上皮PepT1表达的上调作用〔PepT1 mRNA（2
-ΔΔCt）：0.58±0.03比0.66±0.05，PepT1蛋白（PepT1/GAPDH）：0.70±0.02比0.80±0.04，均
P<0.05〕，且小肠上皮细胞损伤加重。
结论:Ghrelin可通过促进胆碱能神经元抑制炎症因子的释放，促进PepT1的转录与翻译，从而在脓毒症中发挥保护作用。
文献关键词：
脓毒症;胆碱能抗炎通路;脑肠肽;肠上皮细胞
中图分类号：
作者姓名：
邵自强;洪军;陈敏华;郑漾;林宗斌;杨向红;孙仁华;刘景全
作者机构：
浙江省人民医院（杭州医学院附属人民医院）急危重症中心重症医学科，杭州 310014
文献出处：
引用格式：
[1]邵自强;洪军;陈敏华;郑漾;林宗斌;杨向红;孙仁华;刘景全-.胆碱能抗炎通路在Ghrelin调控脓毒症大鼠小肠上皮PepT1表达中的作用)[J].中华危重病急救医学,2022(11):1132-1137
A类：
+Ghrelin,BBMV,转录与翻译
B类：
胆碱能抗炎通路,脓毒症,PepT1,脑肠肽,寡肽,转运体,只成,假手,迷走神经,离断,开腹,盲肠结扎穿孔术,CLP,动物模型,时行,静脉注射,生存情况,处死,腔肠,道情,透射电镜,小肠上皮细胞,细胞损伤,伤情,酶联免疫吸附试验,小肠黏膜,囊泡,实时荧光定量聚合酶链反应,qPCR,蛋白质免疫印迹,免疫印迹试验,blotting,累积生存率,断后,暗红色,肠管,蛋白表达水平,大鼠模型,模型制备,后肠,明显好转,2
,Ct,GAPDH,胆碱能神经元,抑制炎症
AB值：
0.125368
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