典型文献
砷及其主要代谢产物对A549细胞凋亡及促凋亡基因Bad和Bik表达的影响
文献摘要：
目的:探讨砷及其主要代谢产物对人肺腺癌细胞系A549细胞凋亡及促凋亡基因
Bad和
Bik表达的影响。
方法:于2020年10月，复苏培养A549细胞，利用细胞计数试剂CCK-8检测细胞活力，确定亚砷酸钠（NaAsO
2）染毒A549细胞的浓度和时间。研究分为NaAsO
2染毒组和代谢产物染毒组：NaAsO
2染毒组染毒剂量为0（对照组）、20、40、60 μmol/L；代谢产物染毒组包括60 μmol/L一甲基胂酸（MMA）染毒组、60 μmol/L二甲基胂酸（DMA）染毒组。采用Hoechst33342/碘化丙啶双染法（Ho/PI）观察细胞凋亡情况，采用实时荧光定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测染毒后细胞Bad和Bik mRNA表达水平，采用蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Bad蛋白、磷酸化Bad（P-Bad-S112）蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白及下游蛋白多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP1）和细胞色素C（Cyt-C）的相对表达情况，采用分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）3、6、8、9的活性变化。
结果:与对照组比较，20、40、60 μmol/L NaAsO
2染毒组凋亡细胞占比明显增加，差异均有统计学意义（
P<0.01）。与对照组比较，2.0、4.0、6.0 μmol/LNaASO
2染毒组Bad mRNA表达水平、Bik mRNA表达水平升高，Bad蛋白、磷酸化Bad蛋白、Bik蛋白、裂解Bik蛋白、PARP1蛋白、Cyt-C蛋白相对表达量均升高，差异均有统计学意义（
P<0.05），Caspase 3、6、8、9活性明显上调，差异均有统计学意义（
P<0.05）。与对照组比较，DMA染毒组Bad mRNA表达水平为1.439±0.173，差异有统计学意义（
P=0.024），Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（
P=0.788）；MMA染毒组Bad和Bik mRNA表达水平差异无统计学意义（
P=0.085、0.063）。与对照组比较，MMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.696±0.023、0.707±0.014、0.907±0.031、1.032±0.016）差异无统计学意义（
P=0.469、0.669、0.859、0.771）；DMA染毒组Bad、Bik、PARP1、Cyt-C蛋白相对表达量（0.698±0.030、0.705±0.022、0.908±0.015、1.029±0.010）差异均无统计学意义（
P=0.479、0.636、0.803、0.984）。
结论:NaAsO
2可通过引起Bad和Bik蛋白过表达，启动磷酸化Bad的负反馈调节以及Bik的降解，激活下游蛋白PARP1、Cyt-C和Caspase途径，介导A549细胞凋亡。
文献关键词：
砷;代谢产物;细胞凋亡;Bad基因;Bik基因;亚砷酸钠;一甲基胂酸;二甲基胂酸
中图分类号：
作者姓名：
周倩;尹锦瑶;谭婧文;李舒婷;蒋成兰;何越峰
作者机构：
昆明医科大学公共卫生学院，昆明 650500
文献出处：
引用格式：
[1]周倩;尹锦瑶;谭婧文;李舒婷;蒋成兰;何越峰-.砷及其主要代谢产物对A549细胞凋亡及促凋亡基因Bad和Bik表达的影响)[J].中华劳动卫生职业病杂志,2022(09):661-667
A类：
Bik,NaAsO
,一甲基胂酸,二甲基胂酸,LNaASO
B类：
代谢产物,A549,促凋亡,凋亡基因,Bad,人肺腺癌细胞,细胞系,CCK,细胞活力,亚砷酸钠,染毒,毒剂,MMA,DMA,Hoechst33342,碘化丙啶,实时荧光定量聚合酶链式反应,荧光定量聚合酶链式反应法,qRT,蛋白免疫印迹法,blotting,磷酸化,S112,白及,多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶,PARP1,细胞色素,Cyt,分光光度法,天冬氨酸,Caspase,活性变化,白相,相对表达量,过表达,负反馈,反馈调节
AB值：
0.149341
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