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TNF-α/TNFR1抑制M1型Kupffer细胞自噬在三氯乙烯致敏小鼠肝损伤中的作用
文献摘要：
目的:检测三氯乙烯（TCE）致敏小鼠肝脏中M1型极化与自噬相关指标表达水平，探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）调控M1型Kupffer细胞自噬在TCE致敏小鼠肝损伤中的作用。方法:于2019年11月，将45只SPF级BALB/c雌性小鼠（6~8周龄），按照单纯随机分组分为4组：空白对照组（
n=5）、溶剂对照组（
n=5）、TCE处理组（
n=18）、TCE+R7050（抑制剂）处理组（
n=17）；经皮致敏小鼠，末次激发后24 h，根据皮肤反应评分情况将小鼠分为致敏组与未致敏组。取小鼠肝脏，光学及电子显微镜下观察肝脏病理变化，蛋白质印迹（Western blotting）检测TNF-α、TNFR1及自噬相关指标表达情况，免疫组化法检测M1型Kupffer细胞标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达情况，免疫荧光双标法检测M1型Kupffer细胞自噬发生情况。
结果:TCE处理组小鼠致敏率为38.9%（7/18），TCE+R7050处理组致敏率为35.3%（6/17），两组差异无统计学意义（
P=1.000）。与空白对照组比较，TCE致敏组小鼠肝细胞形态异常，肝损伤明显，肝细胞内线粒体减少，内质网断裂。Western blotting结果显示，与空白对照组比较，TCE致敏组小鼠肝脏TNF-α、TNFR1蛋白表达升高，M1型Kupffer细胞iNOS蛋白表达升高，自噬微管结合蛋白1-轻链3（LC3B）、Beclin1蛋白表达减少，差异均有统计学意义（
P<0.05）；免疫组化结果显示，空白对照组和溶剂对照组中iNOS未见明显表达，TCE未致敏组可见少量表达，TCE致敏组中阳性染色区域明显，iNOS表达明显升高（
P<0.05）；免疫荧光结果显示，空白对照组、溶剂对照组与TCE未致敏组iNOS蛋白水平较低，仅部分与P62共定位；TCE致敏组iNOS与P62的荧光信号共定位明显增加。
结论:TNF-α/TNFR1信号通路可能通过抑制M1型Kupffer细胞自噬从而诱导TCE致敏小鼠的肝损伤。
文献关键词：
三氯乙烯;Kupffer细胞;自噬;肝损伤;小鼠
中图分类号：
作者姓名：
丁百旺;黄华;杨呓;丁雅妮;朱启星;张家祥
作者机构：
安徽医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系，合肥 230032;安徽医科大学第一附属医院皮肤病研究所，合肥 230032
文献出处：
引用格式：
[1]丁百旺;黄华;杨呓;丁雅妮;朱启星;张家祥-.TNF-α/TNFR1抑制M1型Kupffer细胞自噬在三氯乙烯致敏小鼠肝损伤中的作用)[J].中华劳动卫生职业病杂志,2022(05):321-327
A类：
TCE+R7050
B类：
TNFR1,M1,Kupffer,细胞自噬,三氯乙烯,致敏,肝损伤,小鼠肝脏,SPF,BALB,雌性小鼠,周龄,空白对照,皮肤反应,显微镜下,肝脏病理变化,蛋白质印迹,blotting,免疫组化法,诱导型一氧化氮合酶,iNOS,免疫荧光,肝细胞,细胞形态,内线,内质网,微管结合蛋白,轻链,LC3B,Beclin1,中阳,P62,共定位,荧光信号
AB值：
0.172849
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