典型文献
暴马桑黄赤霉素合成基因GGPS的克隆及诱导表达
文献摘要:
[目的]对参与暴马桑黄赤霉素合成途径关键酶-牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPS)基因进行克隆及诱导表达研究,以期深入了解暴马桑黄的生长发育机制,为获得优质高产的暴马桑黄菌株提供理论依据.[方法]采用PCR扩增技术获得暴马桑黄GGPS基因cDNA全长及启动子序列,利用生物信息学软件对序列进行分析;qRT-PCR技术分析不同浓度茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对暴马桑黄GGPS基因转录水平的影响,并用分光光度计测定不同浓度MeJA诱导下赤霉素含量的变化;电子天平称量暴马桑黄菌丝体生物量;SDS-PAGE检测暴马桑黄GGPS基因原核表达情况.[结果]将克隆得到的暴马桑黄GGPS启动子和基因分别命名为SbGGPS启动子和SbGGPS基因.SbGGPS启动子分析结果显示,除了含有CAAT-box、TATA-box典型的启动子作用元件之外,还含有MeJA响应元件.基因分析发现,SbGGPS基因cDNA序列全长945 bp,共编码314个氨基酸,蛋白相对分子量35.89 kDa,不存在信号肽和跨膜结构.荧光定量分析、赤霉素含量测定及生物量检测结果表明,SbGGPS基因转录水平、赤霉素含量及生物量均随着MeJA浓度增加呈现显著下降的趋势,三者变化趋势基本一致,并且两两之间均呈显著正相关.SDS-PAGE结果显示,SbGGPS基因能够在原核系统中成功表达出蛋白.[结论]通过对SbGGPS基因的克隆及诱导表达分析发现,该基因在暴马桑黄赤霉素生物合成及生长发育过程中具有重要作用.
文献关键词:
暴马桑黄;牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶;基因克隆;赤霉素;茉莉酸甲酯;诱导表达
中图分类号:
作者姓名:
刘增才;唐玉倩;佟鑫宇;邹莉
作者机构:
东北林业大学 林学院,黑龙江 哈尔滨 150040
文献出处:
引用格式:
[1]刘增才;唐玉倩;佟鑫宇;邹莉-.暴马桑黄赤霉素合成基因GGPS的克隆及诱导表达)[J].中南林业科技大学学报,2022(07):160-168
A类:
暴马桑黄,GGPS,牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶,SbGGPS
B类:
诱导表达,合成途径,关键酶,geranylgeranyl,pyrophosphate,synthase,表达研究,优质高产,技术获得,cDNA,全长,启动子序列,利用生物,生物信息学软件,qRT,茉莉酸甲酯,methyl,jasmonate,MeJA,基因转录水平,分光光度计,计测,电子天平,称量,菌丝体生物量,SDS,PAGE,原核表达,启动子分析,CAAT,box,TATA,响应元,基因分析,bp,白相,相对分子量,kDa,信号肽,膜结构,含量测定,表达分析,赤霉素生物合成,基因克隆
AB值:
0.211055
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