目的 探讨左西孟旦(Lev)是否通过调控长链非编码RNA(LncRNA)嗜酸性粒细胞个体发育转录本(EGOT)/微小RNA(miR)-641分子轴从而影响缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞增殖、凋亡及纤维化.方法 体外培养大鼠心肌细胞系H9C2,H/R处理细胞建立细胞损伤模型,随机分为对照(control)组、H/R组、H/R+Lev 1 μmol/L(H/R+Lev-L)组、H/R+Lev 5 μmol/L(H/R+Lev-M)组和 H/R+Lev 10 μmol/L(H/R+Lev-H)组,每组 9 例;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;Real-time PCR检测EGOT、miR-641的mRNA表达水平;分别将pcDNA-EGOT、EGOT小分子干扰RNA(si-EGOT)转染至H9C2细胞,采用上述方法检测细胞增殖及凋亡率;双荧光素酶报告基因实验验证EGOT和miR-641的靶向关系;Western blotting检测Bax、Bcl-2、胶原蛋白Ⅰ型(Col Ⅰ)、胶原蛋白Ⅲ型(Col Ⅲ)、组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达.结果 与control组比较,H/R组细胞存活率降低(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05),Bax、Col Ⅰ、Col Ⅲ、TIMP2和MMP-2蛋白水平升高(P＜0.05),Bcl-2蛋白水平降低(P＜0.05),EGOT的表达水平降低(P＜0.05),miR-641的表达水平升高(P＜0.05);与H/R组比较,H/R+Lev-L组、H/R+Lev-M组及H/R+Lev-H组细胞存活率升高(P＜0.05),细胞凋亡率降低(P＜0.05),Bax、Col Ⅰ、Col Ⅲ、TIMP2 和 MMP-2 蛋白水平降低(P＜0.05),Bcl-2 蛋白水平升高(P＜0.05),EGOT 的表达水平升高(P＜0.05),miR-641的表达水平降低(P＜0.05),且H/R+Lev-L组、H/R+Lev-M组、H/R+Lev-H组各指标比较差异有统计学意义(P＜0.05);双荧光素酶报告基因实验证实EGOT可靶向结合miR-641;转染pcDNA-EGOT与Lev的作用相似;转染si-EGOT可降低Lev对H/R诱导的H9C2细胞增殖、凋亡及纤维化的作用.结论 左西孟旦可能通过上调EGOT表达及下调miR-641表达而促进H/R诱导的H9C2细胞增殖及抑制细胞凋亡、纤维化.

左西孟旦;长链非编码RNA嗜酸性粒细胞个体发育转录本;缺氧/复氧;纤维化;实时定量聚合酶链反应;H9C2细胞系

黄泓轲;罗健玮;冉华

乐山职业技术学院药学系,四川乐山 614000;乐山职业技术学院医学系,四川乐山 614000;重庆市黔江中心医院心内科,重庆 409000

解剖学报

[1]黄泓轲;罗健玮;冉华-.左西孟旦通过调控EGOT/微小RNA-641对缺氧/复氧心肌细胞纤维化的影响)[J].解剖学报,2022(04):479-487

EGOT,R+Lev

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