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昼夜节律变化对RORs表达及RORs激动剂SR1078对角膜上皮创伤修复的影响
文献摘要：
目的:探讨昼夜节律变化对视黄酸相关孤儿受体(RORs)表达量及RORs激动剂SR1078对角膜上皮创伤修复的影响。方法:选取SPF级6~8周龄C57BL/6雌性小鼠228只，采用随机数表法将其中180只小鼠分为昼夜节律正常组、全昼组、全夜组、昼夜颠倒12 h组和昼夜颠倒3周组，每组36只。将剩余48只小鼠采用随机数表法随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组和SR1078组，每组24只。按照分组，将小鼠置于可控制光照(光照强度300 lx)及黑暗时间的节律箱中，其中昼夜节律正常组、PBS对照组和SR1078组节律箱的光照时间为7：00~19：00，黑暗时间为19：00~次日7：00。根据Zeitgeber Time计时法，以开始光照时间7：00记为ZT0，以关闭光照时间19：00记为ZT12。采用实时荧光定量PCR法检测昼夜节律正常组、全夜组、全昼组、昼夜颠倒12 h组和昼夜颠倒3周组ZT1、ZT5、ZT9、ZT13、ZT17、ZT21各时间点RORα和RORγ mRNA相对表达量。PBS对照组和SR1078组采用高尔夫样刀建立小鼠角膜上皮损伤模型并按照分组情况用相应试剂点眼，每隔6 h给药1次。采用Adobe Photoshop CC2019软件测量角膜上皮缺损面积，计算并比较2个组角膜上皮缺损率。分析昼夜节律正常组、全昼组、全夜组、昼夜颠倒12 h组和昼夜颠倒3周组小鼠角膜上皮RORα和RORγ mRNA相对表达量与PBS对照组和SR1078组角膜上皮缺损率的相关性。采用全角膜铺片及免疫荧光染色法观察角膜上皮修复情况，计算并比较PBS对照组和SR1078组小鼠角膜上皮分裂细胞数量。结果:与昼夜节律正常组比较，全昼组、全夜组、昼夜颠倒12 h组和昼夜颠倒3周组小鼠RORα/RORγ mRNA相对表达量整体呈减少趋势。造模后不同时间点PBS对照组和SR1078组小鼠角膜上皮缺损率总体比较差异有统计学意义(
F组别＝74.01，
P<0.001；
F时间＝5 171.48，
P<0.001)，其中造模后12 h SR1078组角膜上皮缺损率显著低于PBS对照组，差异有统计学意义(
P<0.05)。角膜组织中RORα和RORγ mRNA相对表达量与小鼠角膜上皮缺损率均呈中度正相关(
r＝0.614、0.537，均
P<0.01)；RORα mRNA相对表达量与角膜上皮缺损率变化量的直线回归方程为Y＝33.153X-43.052(
F＝20.58，
P<0.001)，RORγ mRNA相对表达量与角膜上皮缺损率变化量的直线回归方程为Y＝2.764X-1.364(
F＝13.11，
P<0.001)。造模后不同时间点SR1078组和PBS对照组小鼠角膜上皮分裂细胞数量总体比较差异有统计学意义(
F分组＝160.55，
P<0.001；
F时间＝83.57，
P<0.001)，其中造模后24、30、36 h SR1078组分裂细胞数目显著少于PBS对照组，差异均有统计学意义(均
P<0.05)。
结论:昼夜节律变化使小鼠角膜中RORα和RORγ mRNA表达减少，SR1078可通过促进角膜上皮RORα和RORγ mRNA的表达使小鼠角膜上皮分裂细胞数量减少，抑制角膜创伤后的修复过程。
文献关键词：
角膜;昼夜节律;创伤修复;SR1078;时钟基因
中图分类号：
作者姓名：
徐鹏洋;李志杰;薛芸霞
作者机构：
暨南大学基础医学院病理生理学系，广州 510632;暨南大学基础医学院眼科研究所，广州 510632
文献出处：
引用格式：
[1]徐鹏洋;李志杰;薛芸霞-.昼夜节律变化对RORs表达及RORs激动剂SR1078对角膜上皮创伤修复的影响)[J].中华实验眼科杂志,2022(02):118-125
A类：
RORs,SR1078,Zeitgeber,ZT5,ZT9,ZT13,ZT17,ZT21,CC2019,764X
B类：
昼夜节律变化,激动剂,对角,角膜上皮,创伤修复,对视,视黄酸相关孤儿受体,SPF,周龄,C57BL,雌性小鼠,颠倒,磷酸盐缓冲液,PBS,光照强度,lx,黑暗,光照时间,次日,Time,记为,ZT0,ZT12,相对表达量,高尔夫,皮损,损伤模型,应试,每隔,Adobe,Photoshop,量角,上皮缺损,全角,免疫荧光染色法,分裂细胞,细胞数量,不同时间点,组别,变化量,153X,创伤后,修复过程,时钟基因
AB值：
0.144976
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