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一种用于PCR的番茄DNA快速粗提方法
文献摘要：
在对植物进行分子生物学研究时需要提取植物基因组DNA并对其进行PCR克隆,目前实验室常用CTAB法提取植物DNA,但其步骤相对繁琐,需要用有机溶剂反复抽提,在样本较多时,耗时较长.NaOH可以提取多种物种DNA,本研究优化了实验室条件下更加快速、经济、安全、高效的提取植物DNA的方式,主要包括以下步骤:利用液氮快速粉碎植物样品;采用碱裂解(0.5 mol/L NaOH)的方式一步提取DNA;提取的DNA利用TE缓冲液进行中和;以中和的粗提DNA作为模板进行PCR反应.本研究利用简单的DNA提取流程并结合PCR检测方式,完成了番茄转化子的快速初步鉴定.同时还证明了该NaOH法可用于番茄不同组织的DNA提取.本研究中整个操作过程步骤简单,耗时短,可在短时间内完成大量植物样品的DNA提取,无需使用氯仿、异丙醇等有毒物质,完成提取时间约为CTAB提取法的1/5,而且提取的不同组织DNA完整性较好,质量可观,满足常规的PCR检测,可用于基因克隆及转化子筛选鉴定,具有一定的利用价值和应用前景.
文献关键词：
番茄;NaOH;DNA提取;PCR;转化子鉴定
中图分类号：
作者姓名：
申恒;刘思慧;李跃;李敬涛;梁文星
作者机构：
青岛农业大学植物医学学院 山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109;青岛农业大学理学与信息技术学院,青岛 266109
文献出处：
引用格式：
[1]申恒;刘思慧;李跃;李敬涛;梁文星-.一种用于PCR的番茄DNA快速粗提方法)[J].生物技术通报,2022(06):74-80
A类：
转化子鉴定
B类：
番茄,对植,分子生物学研究,植物基,CTAB,有机溶剂,抽提,NaOH,研究优化,下步,液氮,粉碎,植物样品,碱裂解,TE,缓冲液,研究利用,检测方式,不同组织,操作过程,氯仿,异丙醇,有毒物质,提取时间,提取法,基因克隆,筛选鉴定,利用价值
AB值：
0.322249
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