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甜橙中UDP-鼠李糖合成酶基因CsRHM的克隆与鉴定
文献摘要：
UDP-鼠李糖是一种由鼠李糖合成酶(rhamnose synthase,RHM)催化合成的糖苷供体,是合成各种鼠李糖糖苷类次生代谢产物的重要组成之一.该研究从甜橙中首次克隆得到一个RHM基因(CsRHM),并进行生物学信息分析,体外功能鉴定等特异性分析.结果显示CsRHM的开放阅读框为2 007 bp,编码668个氨基酸,推测相对分子质量为75.27 kDa,理论等电点为6.97,具有RHM酶家族的特征信号序列(GxxGxxG/A和YxxxK).多序列对比与系统进化树显示,CsRHM与其他物种的RHM具有同源性.体外酶促反应结果证实CsRHM重组蛋白具有将UDP-葡萄糖转化为UDP-鼠李糖的催化活性,并且明确了其催化的酶动力学参数Vmax=0.373 7 μmol·L-1·min-1,Km=21.29 μmol·L-1,Kcat=0.24 s-1,Kcat/Km=1.13×104 s-1.L·mol-1.该研究首次报道了 CsRHM,并验证了其体外催化功能,为进一步研究生物合成UDP-鼠李糖奠定基础.
文献关键词：
甜橙;鼠李糖合成酶;UDP-鼠李糖;功能鉴定;酶动力学
中图分类号：
作者姓名：
于宛彤;侯康鑫;苏新堯;张晓丽;邱杰;王彩霞;薛强;刘金龙
作者机构：
河北科技大学食品与生物学院,河北石家庄050018;中国中医科学院中药研究所,北京100700;天津中医药大学,天津301617;北京林业大学生物科学与技术学院,北京100700;华侨大学生物医学学院,福建泉州362021
文献出处：
引用格式：
[1]于宛彤;侯康鑫;苏新堯;张晓丽;邱杰;王彩霞;薛强;刘金龙-.甜橙中UDP-鼠李糖合成酶基因CsRHM的克隆与鉴定)[J].中国中药杂志,2022(12):3208-3214
A类：
CsRHM,GxxGxxG,YxxxK
B类：
甜橙,UDP,鼠李糖合成酶,合成酶基,酶基因,rhamnose,synthase,催化合成,糖苷,供体,糖糖,苷类,次生代谢产物,生物学信息分析,外功,功能鉴定,开放阅读框,bp,相对分子质量,kDa,等电点,特征信号,系统进化树,同源性,体外酶促反应,重组蛋白,葡萄糖转化,催化活性,酶动力学,动力学参数,Vmax,Km,Kcat,首次报道,生物合成
AB值：
0.323307
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