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霍山石斛类黄酮-3-O-糖基转移酶(DhUF3GT)基因克隆与原核表达分析
文献摘要：
目的 克隆霍山石斛类黄酮-3-O-糖基转移酶(DhUF3GT)基因并进行生物信息学分析,为进一步培育高黄酮含量的霍山石斛药材提供理论依据.方法 根据前期霍山石斛转录组数据筛选出的基因DhUF3GT,克隆该基因,并对cDNA的核酸序列进行生物信息学分析,同时构建DhUF3GT-pET28(a)重组质粒进行原核表达分析.结果 测序结果 显示,霍山石斛DhUF3GT基因cDNA序列有1289 bp,包含一个长度为1239 bp的开放阅读框,编码412个氨基酸,GenBank中的登录号为OM460827.生物信息学分析表明:DhUF3GT蛋白属于亲水性稳定蛋白,理论相对分子质量为45.668 KD,等电点(PI)为5.98,具有多个磷酸化位点和两个糖基化位点,不含信号肽,亚细胞定位于叶绿体.系统进化树表明,该序列与同科植物铁皮石斛同源性最高,具有UGT家族的"PSPG Box"保守区域.SDS-PAGE电泳显示,成功表达出原核重组蛋白DhUF3GT-pET28(a).结论 成功克隆出霍山石斛DhUF3GT基因序列,并获得其序列特征及原核表达蛋白,这有助于霍山石斛DhUF3GT功能的进一步研究及类黄酮化合物的生物合成机制的阐明.
文献关键词：
霍山石斛;类黄酮-3-O-糖基转移酶;生物信息学分析;原核表达
中图分类号：
作者姓名：
瞿彩丽;刘雨馨;李永华;汪文杰;余坤;龚玲
作者机构：
湖北中医药大学药学院 武汉 430065
文献出处：
引用格式：
[1]瞿彩丽;刘雨馨;李永华;汪文杰;余坤;龚玲-.霍山石斛类黄酮-3-O-糖基转移酶(DhUF3GT)基因克隆与原核表达分析)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(04):1400-1410
A类：
DhUF3GT,OM460827
B类：
霍山石斛,类黄酮,糖基转移酶,基因克隆,原核表达,表达分析,生物信息学分析,黄酮含量,转录组数据,数据筛选,cDNA,pET28,重组质粒,列有,bp,开放阅读框,GenBank,登录号,亲水性,相对分子质量,KD,等电点,磷酸化,糖基化位点,信号肽,亚细胞定位,叶绿体,系统进化树,同科,铁皮石斛,同源性,UGT,PSPG,Box,SDS,PAGE,电泳显示,重组蛋白,基因序列,序列特征,黄酮化合物,生物合成机制
AB值：
0.247844
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