目的:比较研究两种人胚胎干细胞系H8和H9在维持培养、向神经前体细胞和神经元方向分化的特性.方法:采用mTeSR1做为基本培养基,Matrigel做为基质胶,进行无滋养层的维持培养.采用白细胞抑制因子1(Smad-1)双抑制剂的神经前体细胞诱导,和含B27的Neurobasal联合脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的神经元诱导方案.采用免疫荧光化学染色检测胚胎干细胞标记蛋白(Nanog和OCT4)、神经前体细胞标记蛋白(Nestin、Sox2和Pax6)、神经元标记蛋白Tuj-1的表达.结果:在维持培养和神经诱导的早期:H8和H9细胞在胚胎干细胞标记蛋白表达及类胚体形成方面无显著差异.神经前体细胞阶段:诱导分化相同时间(诱导14 d),两种细胞系的玫瑰花环样结构形成,及巢蛋白(Nestin)、SRY转录因子2(Sox2)的表达均无显著差异;相对而言,更高比例的H9细胞表达神经前体细胞标记蛋白成对同源基因盒6(Pax6).神经元阶段:诱导相同时间(诱导30 d),约89％的H9细胞表达神经元标记蛋白Tuj-1,而仅约34％的H8细胞表达Tuj-1.结论:H8、H9细胞的胚胎干细胞特性相似.与H8相比,H9细胞的神经元方向分化效率更高,更适合进行神经系统疾病机制及转化研究.

胚胎干细胞;神经干细胞;诱导分化;神经前体细胞;神经元

陈安迪;李子杰;赵又谊;武胜昔;刘加强;王亚周

空军军医大学基础医学院神经生物学教研室,西安710032;空军军医大学口腔医院口腔麻醉学教研室,西安710032;联合参谋部警卫局卫生保健处,北京100017

神经解剖学杂志

[1]陈安迪;李子杰;赵又谊;武胜昔;刘加强;王亚周-.两种人胚胎干细胞系向神经元方向诱导分化的比较研究)[J].神经解剖学杂志,2022(01):21-27

mTeSR1,类胚体

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