典型文献
杜梨PbGID1 家族基因克隆、CRISPR/Cas9 载体构建及遗传转化
文献摘要：
为明确杜梨赤霉素受体(GID1)的生物学功能,以杜梨为试材,通过同源克隆方法得到PbGID1s基因,利用生物信息学分析软件构建基因结构并设计靶位点;利用酶切-连接方法将带有靶点的sgRNA表达盒构建至CRISPR/Cas9 表达载体上;通过农杆菌介导方法,将CRISPR/Cas9 表达载体转化至杜梨子叶中.结果表明,在杜梨基因组中克隆得到4 个PbGID1s,分别命名为PbGID1b-1、PbGID1b-2、PbGID1c-1、PbGID1c-2,基因结构分析显示该家族基因均由2 个外显子和1 个内含子组成;氨基酸序列比对发现,PbGID1s均具有GID1 家族所特有的HGG和GXSXG保守结构域;将含有5 个靶位点的sgRNA表达盒成功构建至pYLCRISPR/Cas9P35S-N植物表达载体上,可同时对该家族4 个基因进行编辑;杜梨遗传转化试验结果表明,共计浸染595 粒杜梨子叶,获得抗性芽176 个,阳性植株33 株,转化效率达到5.55％.成功构建了可以同时靶向杜梨PbGID1s家族基因的CRISPR/Cas9 载体,通过农杆菌介导,成功将该载体转化至杜梨子叶,并获得阳性植株.
文献关键词：
杜梨;GA受体;GID1;CRISPR/Cas9;遗传转化
中图分类号：
作者姓名：
宋平丽;李刚;许建锋;马青翠;亓宝秀;张玉星
作者机构：
河北农业大学 园艺学院,河北 保定 071000;利物浦约翰摩尔斯大学,利物浦 L33AF
文献出处：
引用格式：
[1]宋平丽;李刚;许建锋;马青翠;亓宝秀;张玉星-.杜梨PbGID1 家族基因克隆、CRISPR/Cas9 载体构建及遗传转化)[J].华北农学报,2022(06):15-22
A类：
PbGID1,PbGID1s,PbGID1b,PbGID1c,GXSXG,Cas9P35S
B类：
杜梨,家族基因,基因克隆,载体构建,遗传转化,赤霉素,生物学功能,同源克隆,利用生物,生物信息学分析,软件构建,基因结构,靶位,sgRNA,表达盒,农杆菌介导,梨子,子叶,外显子,内含子,子组,氨基酸序列比对,HGG,保守结构域,pYLCRISPR,植物表达载体,浸染,获得抗性,植株,转化效率,GA
AB值：
0.254414
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