典型文献
在中国大豆品种上创建ALSV诱导的基因沉默体系
文献摘要：
[目的]在中国大豆品种上建立以苹果潜隐球形病毒(apple latent spherical virus,ALSV)为载体的基因沉默体系,为中国大豆品种的基因功能和遗传育种提供一种简便、省时、易操作的技术体系.[方法]构建以农杆菌介导接种的ALSV病毒侵染性克隆载体.从大豆品种威廉姆斯82(Williams 82)中特异扩增327 bp的八氢番茄红素脱氢酶(GmPDS)基因cDNA片段,插入病毒载体pALSV2.通过农杆菌浸润法将病毒载体导入模式植物本氏烟(Nicotiana benthamiana),17 d后富集病毒粒子,摩擦接种大豆第一轮真叶,以接种病毒空载作为对照组,持续观察测试大豆植株系统叶表型,并结合逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)或荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ALSV衣壳蛋白基因(CP)和GmPDS的表达水平.[结果]ALSV ∶GmPDS接种大豆品种威廉姆斯82和南农1138-2,20 d后,前者系统叶未见白化表型,而后者系统叶出现明显的白化表型;qRT-PCR检测结果表明,发生白化的南农1138-2植株中GmPDS的表达水平显著降低,未出现白化表型的威廉姆斯82中GmPDS的表达水平没有出现显著变化.在此基础上,采用相同的方法,测试了 ALSV在其他9种大豆品种中诱导GmPDS的沉默效率,发现在南农47、安豆203、祥斗4号、中黄13、山宁29、齐黄34等大豆品种上接种ALSV:GmPDS后植株系统叶均产生白化表型,而菏豆12、中黄311和山宁16等3个品种的GmPDS均不能诱导有效沉默.[结论]构建了农杆菌介导的ALSV病毒载体,利用本氏烟扩繁富集ALSV病毒,将提纯的病毒粒体摩擦接种大豆真叶,在多个中国大豆品种上成功建立了基因沉默体系.
文献关键词：
病毒诱导的基因沉默;大豆;苹果潜隐球形病毒;大豆八氢番茄红素脱氢酶基因
中图分类号：
作者姓名：
董永鑫;卫其巍;洪浩;黄莹;赵延晓;冯明峰;窦道龙;徐毅;陶小荣
作者机构：
南京农业大学植物保护学院/农业农村部大豆病虫害防控重点实验室,南京210095;四川省达州市农业科学研究院,四川达州635000
文献出处：
引用格式：
[1]董永鑫;卫其巍;洪浩;黄莹;赵延晓;冯明峰;窦道龙;徐毅;陶小荣-.在中国大豆品种上创建ALSV诱导的基因沉默体系)[J].中国农业科学,2022(09):1710-1722
A类：
ALSV,苹果潜隐球形病毒,农杆菌介导接种,GmPDS,pALSV2,大豆八氢番茄红素脱氢酶基因
B类：
大豆品种,apple,latent,spherical,virus,基因功能,遗传育种,省时,病毒侵染,侵染性克隆,克隆载体,威廉姆斯,Williams,bp,cDNA,病毒载体,浸润法,本氏烟,Nicotiana,benthamiana,第一轮,真叶,空载,大豆植株,株系,叶表型,逆转录,聚合酶链式反应,qRT,衣壳蛋白,CP,白化,中黄,上接,扩繁,提纯,病毒粒体,上成,病毒诱导的基因沉默
AB值：
0.213501
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