目的:观察热补针法对类风湿性关节炎(R A)寒证模型家兔血清炎性因子及膝关节滑膜组织自噬的影响,探讨热补针法治疗RA的抗炎机制.方法:清洁级新西兰家兔随机分为正常组、模型组、热补针法组、抑制剂组和激动剂组,每组10只.采用弗氏佐剂、卵蛋白混合溶液注射联合低温冷冻+风寒湿法建立RA寒证模型.热补针法组予"足三里"施热补针法干预,留针30 min,1次/d,干预14 d;抑制剂组和激动剂组分别腹腔注射自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(1.9 mg/kg)和自噬激动剂雷帕霉素(2.5 mg/kg),隔日1次,共7次.测量各组家兔膝关节周径、皮肤温度;用彩色多普勒超声检查家兔膝关节滑膜厚度、关节腔积液及内部血流信号;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6及C反应蛋白(CRP)含量;透射电镜观察滑膜细胞超微形态结构及自噬小体;Western blot法检测滑膜组织自噬相关蛋白Atg5、Unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)、微管相关蛋白轻链3B(LC3B)及Beclin-1的表达水平;荧光定量PCR法检测滑膜组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)、核因子-κB(NF-κB)mRNA的表达水平.结果:与正常组比较,模型组家兔膝关节周径显著增大(P<0.01),皮肤温度明显降低(P<0.01),血清TNF-α、IL-1β、IL-6及CRP含量升高(P<0.01),滑膜组织Atg5、ULK1、Beclin-1蛋白表达水平及LC3BⅡ/LC3BⅠ显著降低(P<0.01),NLRP3、NF-κB mRNA表达水平显著升高(P<0.01).与模型组、抑制剂组比较,热补针法组及激动剂组膝关节周径缩小(P<0.01),皮肤温度升高(P<0.01),血清TNF-α、IL-1β、IL-6及CRP含量降低(P<0.01),滑膜组织Atg5、ULK1、Beclin-1表达水平及LC3BⅡ/LC3BⅠ升高(P<0.01),NLRP3、NF-κB mRNA表达水平显著降低(P<0.01).正常组家兔关节滑膜光滑平整,无关节腔积液及异常血流信号,滑膜细胞核染色致密均匀,核膜光滑完整;模型组滑膜增厚、血流信号丰富,关节囊积液明显,滑膜细胞核染色质固缩,核膜模糊残缺,偶见自噬小体;热补针法组及激动剂组滑膜变薄、血流信号减弱,滑膜细胞核染色固缩不明显,细胞核膜较清晰,可见吞噬泡及自噬小体;抑制剂组上述改善均不明显.结论:热补针法能显著缓解RA寒证模型家兔膝关节滑膜炎性反应,其机制可能与增强滑膜细胞自噬活性,抑制炎性因子T N F-α、IL-1β、IL-6及CRP的合成与释放有关.

类风湿性关节炎;热补针法;滑膜炎性反应;自噬

甘肃中医药大学针灸推拿学院,兰州730000;甘肃中医药大学附属医院郑氏针灸科,兰州730000

[1]苏成红;杜小正;方晓丽;刘强;刘莉梅;宋亚文;姜影;井维尧;李福欣-.热补针法对类风湿关节炎寒证模型家兔血清炎性因子及膝关节滑膜组织自噬的影响)[J].针刺研究,2022(09):769-777

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