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类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-糖蛋白表达及功能变化研究
文献摘要：
目的:研究类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达及功能的变化,并探讨其与炎症的关系.方法:(1)在体实验采用雌性Wistar大鼠,随机分为对照组和造模组(n=12),造模组建立II型胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型,Western blot检测大鼠滑膜细胞P-gp的表达.(2)动物细胞体外培养实验采用II型胶原酶法分离培养正常大鼠原代滑膜细胞,分为正常培养液(DMEM)组和巨噬细胞条件培养液(macrophage-conditioned medium,MCM)组,源于RAW 264.7细胞的MCM模拟体内炎症状态,Western blot法检测大鼠滑膜细胞P-gp蛋白表达水平,RT-qPCR法检测大鼠滑膜细胞多药耐药基因1a(multidrug re?sistance gene 1a,Mdr1a)和Mdr1b的mRNA表达水平,以罗丹明123(rhodamine 123,Rho123)及氨甲蝶呤(metho?trexate,MTX)为探针评价细胞中P-gp的功能.结果:与对照组大鼠相比,CIA造模组大鼠滑膜细胞P-gp表达显著降低(P<0.01);II型胶原酶消化法可以成功获得大鼠原代滑膜细胞,免疫荧光显示第3代滑膜细胞98％以上表达vimentin蛋白;维拉帕米(50和100μmol/L)能显著增加大鼠滑膜细胞中Rho123的浓度(P<0.01);与DMEM组相比,MCM组滑膜细胞Rho123摄取量显著升高(P<0.01),MTX摄取量亦显著升高(P<0.05),分别增加了40％和37％,P-gp蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Mdr1a的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),Mdr1b的mRNA表达水平无显著差异.结论:类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-gp表达及功能显著降低,可能与局部炎症微环境有关.
文献关键词：
类风湿性关节炎;P-糖蛋白;滑膜细胞;巨噬细胞
中图分类号：
作者姓名：
黄陈;余丹;杨海峰
作者机构：
江苏农牧科技职业学院,江苏泰州225300;南京中医药大学医学院整合医学学院,江苏南京210023
文献出处：
引用格式：
[1]黄陈;余丹;杨海峰-.类风湿性关节炎状态下大鼠滑膜细胞P-糖蛋白表达及功能变化研究)[J].中国病理生理杂志,2022(04):712-719
A类：
Mdr1a,Mdr1b,metho,trexate
B类：
类风湿性关节炎,滑膜细胞,糖蛋白表达,变化研究,glycoprotein,gp,雌性,Wistar,模组,II,collagen,induced,arthritis,CIA,blot,动物细胞,细胞体,体外培养,胶原酶法,分离培养,养正,原代,DMEM,巨噬细胞,条件培养液,macrophage,conditioned,medium,MCM,RAW,体内炎症,炎症状态,蛋白表达水平,qPCR,多药耐药基因,multidrug,sistance,gene,罗丹明,rhodamine,Rho123,氨甲蝶呤,MTX,胶原酶消化法,免疫荧光,vimentin,维拉帕米,摄取量,炎症微环境
AB值：
0.257155
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