目的:研究牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas lipopolysaccharide,LPS-PG)对牙周膜成纤维细胞(mouse periodontal Lig-ament:Normal Fibroblasts,mPDLFs)增殖及迁移的影响,探讨TXNIP/Nlrp3炎性体途径在其中的作用.方法:采用不同浓度的LPS-PG刺激小鼠mPDLFs细胞不同时间,CCK-8法检测细胞增殖抑制率.然后将细胞分为对照组(培养基作用24h)和LPS-PG组(2 M的LPS-PG作用24 h),划痕实验检测细胞迁移,ELISA法检测白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)和高迁移率族蛋白B1(High mobility group protein B1,HMGB1)的水平,Western Blot 检测 Nod 样受体蛋白3(Nod-like receptor pyrin domain3,NL-RP3)、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、活化半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase-1)和硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin-interacting protein,TXNIP)的表达,免疫共沉淀检测以上蛋白间的相互作用.结果:与0 M的LPS-PG相比,1M和2 M的LPS-PG可显著增加mPDLFs的细胞增殖抑制率(P＜0.05).与LPS-PG作用0h相比,LPS-PG作用12h、24h和48 h均可显著增加mPDLFs的细胞增殖抑制率(P＜0.05).LPS-PG组细胞向中间＇伤口,迁移的距离及细胞数量远远低于对照组.与对照组相比,LPS-PG组细胞中IL-1β和HMGB1的水平、NLRP3、cleaved-caspase-1和TXNIP蛋白表达均显著增加,且NLRP3和ASC、NLRP3和cleaved-caspase-1、TXNIP和NLRP3的蛋白互作能力显著增强(P＜0.05),而两组ASC蛋白的表达无显著差异(P＞0.05).结论:LPS-PG可抑制mPDLFs细胞的增殖和迁移,其机制与Nlrp3炎性体的形成与活化有密切的关系.

牙龈卟啉单胞菌脂多糖;TXNIP/Nlrp3途径;牙周膜成纤维细胞;迁移

俞梅;李娜;喻锦娴;王文茜;刘思佳;徐佳

湖北中医药大学附属国医医院口腔科 湖北武汉430000;湖北中医药大学附属国医医院耳鼻喉科 湖北武汉430000;武汉大学医学院附属中山医院(湖北省第三人民医院)放射科 湖北武汉430033

现代生物医学进展

[1]俞梅;李娜;喻锦娴;王文茜;刘思佳;徐佳-.牙龈卟啉单胞菌脂多糖通过TXNIP/Nlrp3炎性通路对小鼠牙周膜成纤维细胞迁移的影响)[J].现代生物医学进展,2022(05):832-836,862

mPDLFs,domain3

牙龈卟啉单胞菌脂多糖,TXNIP,Nlrp3,炎性通路,牙周膜成纤维细胞,细胞迁移,Porphyromonas,lipopolysaccharide,LPS,PG,mouse,periodontal,Lig,ament,Normal,Fibroblasts,炎性体,CCK,增殖抑制,抑制率,基作用,24h,划痕实验,实验检测,Interleukin,高迁移率族蛋白,High,mobility,group,protein,HMGB1,Blot,Nod,样受体,受体蛋白,like,receptor,pyrin,凋亡相关斑点样蛋白,Apoptosis,associated,speck,ASC,半胱氨酸蛋白酶,cleaved,caspase,硫氧还蛋白相互作用蛋白,Thioredoxin,interacting,免疫共沉淀,1M,0h,12h,伤口,细胞数量,NLRP3,蛋白互作,可抑制,细胞的增殖,增殖和迁移

0.30851