目的:探究CXC趋化因子配体10(CXCL10)在癫痫大鼠和细胞炎症反应中的作用及机制.方法:构建大鼠癫痫模型,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测对照组和模型组大鼠中CXCL10表达.无镁细胞液处理SH-SY5Y细胞建立癫痫细胞模型(SH-SY5Y组),采用qRT-PCR检测空白组和SH-SY5Y组中CXCL10表达.用pcDNA3.1-CXCL10或si-CXCL10转染SH-SY5Y细胞,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测pcDNA3.1组、pcDNA3.1-CXCL10组、si-RNA组和si-CXCL10组中炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-8]水平.SH-SY5Y细胞通过转染si-CXCL10或经Toll样受体4(TLR4)抑制剂(TAK-242)和激动剂脂多糖(LPS)处理,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测si-RNA组、si-CXCL10组、si-CXCL10+TAK-242组和si-CXCL10+LPS组中TLR4、NF-κB p-p65/p65蛋白表达水平.结果:模型组大鼠CXCL10 mRNA表达水平高于对照组(P<0.05).SH-5Y5Y组细胞CXCL10 mRNA水平高于空白组(P<0.05).过表达CXCL10升高SH-SY5Y细胞CXCL10 mRNA表达水平,而抑制CXCL10降低了SH-SY5Y细胞CXCL10 mRNA表达水平(均P<0.05).此外,过表达CXCL10使SH-SY5Y细胞培养液中TNF-α、IL-6和IL-8水平显著上升,si-CXCL10使SH-SY5Y细胞TNF-α、IL-6和IL-8水平显著下降(均P<0.05).过表达CXCL10促进了TLR4和NF-κB p-p65/p65蛋白表达,而敲低CXCL10可抑制TLR4和NF-κB p-p65/p65蛋白水平(均P<0.05).与si-CXCL10组比较,经LPS处理的癫痫模型细胞TNF-α、IL-6、IL-8水平上升,而经TAK-242处理的癫痫模型细胞TNF-α、IL-6、IL-8水平显著下降(均P<0.05).结论:CXCL10在癫痫大鼠和细胞中相对表达量均升高,沉默CXCL10可通过TLR4/NF-κB信号通路抑制炎性细胞因子表达,在癫痫炎症反应过程中发挥重要作用.

癫痫;CXC趋化因子配体10;Toll样受体4;核因子-κB;炎症因子;大鼠模型

杨谦;曹冰清;韩征;薛延莉;康涛

陕西省人民医院神经内科,陕西 西安 710068

陕西医学杂志

[1]杨谦;曹冰清;韩征;薛延莉;康涛-.CXC趋化因子配体10在癫痫大鼠和细胞炎症反应中的作用及机制研究)[J].陕西医学杂志,2022(12):1483-1487

CXCL10+TAK,CXCL10+LPS,5Y5Y

趋化因子配体,细胞炎症,癫痫模型,qRT,细胞液,SH,SY5Y,细胞模型,pcDNA3,si,转染,酶联免疫吸附,炎症细胞因子,Toll,样受体,TLR4,激动剂,脂多糖,蛋白免疫印迹,blot,p65,蛋白表达水平,过表达,细胞培养,培养液,敲低,可抑制,相对表达量,炎性细胞因子,反应过程,核因子,大鼠模型

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