目的 探讨ERK1/2通路在耐药黑色素瘤药物成瘾性中的作用,并在此基础上,探究间歇性给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂对耐药黑色素瘤细胞增殖的影响.方法 体外培养黑色素瘤药物敏感株(A375和M14细胞)和对威罗菲尼耐受的细胞株(A375/R0.5、A375/R2.0、M14/R0.5和M14/R2.0),用MEK抑制剂U0126抑制ERK1/2激活,用Western-blot检测ERK1/2等蛋白的表达,用克隆形成实验观察细胞的增殖能力.利用活性分子TBHQ激活ERK1/2通路,利用ML329抑制MITF,二者均可上调ERK1/2-MITF通路活性,导致下游MITF抑制.采用耐药细胞A375/R2.0观察"撤除威罗菲尼"联合"TBHQ或ML329"对细胞增殖的影响.结果 克隆形成实验显示,在撤除威罗菲尼后,耐药细胞增殖减慢,如在撤药同时,用MEK抑制剂U0126抑制ERK1/2活化,可逆转撤药导致的增殖抑制,证明ERK1/2活化是耐药细胞药物成瘾性的关键机制.相反,如在撤除威罗菲尼同时,添加ERK1/2激活剂TBHQ或MITF抑制剂ML329,以进一步激活ERK1/2-MITF通路,结果发现,二者均可进一步抑制耐药细胞的增殖,提示撤药和ERK1/2-MITF通路活化产生了协同抑瘤效应.结论 本研究从新的角度证明了ERK1/2通路在耐药黑色素瘤细胞药物成瘾性中的作用,并提示间歇性给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂可更有效地抑制耐药黑色素瘤增殖,有望为防治黑色素瘤耐药提供新思路.

黑色素瘤;威罗菲尼;药物成瘾性;间歇性治疗;ERK1/2通路

姚琳;阮杰;林紫均;袁源;邱思仪;蒋智文;郑慧玲;彭健愉;孙明轩;刘新光;孙雪荣

广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室衰老研究所,广东东莞523808;广东医科大学医学技术学院,广东东莞523808;广东医科大学基础医学院,广东东莞523808;广东医科大学生物化学与分子生物学研究所,广东东莞523808

中国热带医学

[1]姚琳;阮杰;林紫均;袁源;邱思仪;蒋智文;郑慧玲;彭健愉;孙明轩;刘新光;孙雪荣-.间歇给药联合ERK1/2-MITF通路激活剂抑制耐药黑色素瘤细胞增殖的研究)[J].中国热带医学,2022(02):106-111,122

威罗菲尼,ML329

ERK1,MITF,激活剂,黑色素瘤细胞,药物成瘾性,体外培养,药物敏感,A375,M14,细胞株,R0,MEK,U0126,blot,克隆形成,实验观察,细胞的增殖,用活,TBHQ,可上,撤除,减慢,如在,撤药,增殖抑制,关键机制,抑瘤,间歇性治疗

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