目的:观察黄芪甲苷对溶血磷脂酸（LPA）诱导的小鼠神经母细胞瘤细胞（N1E-115）神经突起回缩的影响，探讨其作用机制。方法:将N1E-115细胞按随机数字表法分为空白组、模型组及0、40、80 μg/ml黄芪甲苷组。0、40、80 μg/ml黄芪甲苷组分别以20、40、80 μg/ml黄芪甲苷干预24 h，空白组及模型组不做药物干预，每组以无血清培养12 h，模型组及黄芪甲苷各浓度组以40 μmol/L的LPA干预10 min。于倒置显微镜观察并拍照，采用Image J软件计数N1E-115细胞神经突起数量；采用免疫荧光染色法检测细胞RAS同源基因家族成员A（RhoA）、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2（ROCK2）、p-ROCK2、磷酸化肌球蛋白轻链2（p-MLC2）蛋白表达；荧光实时定量PCR法检测RhoA、ROCK2 mRNA水平；Western blot法检测RhoA、ROCK2、p-MLC2、肌球蛋白轻链2（MLC2）蛋白表达。结果:与20 μg/ml黄芪甲苷组比较，40、80 μg/ml黄芪甲苷组神经突起回缩抑制率升高（ P<0.05）；与模型组比较，20、40、80 μg/ml黄芪甲苷组RhoA、p-ROCK2、p-MLC2蛋白平均荧光强度及40 μg/ml黄芪甲苷组ROCK2蛋白平均荧光强度降低（ P<0.05或 P<0.01）；20、40、80 μg/ml黄芪甲苷组RhoA mRNA［（0.89±0.09）、（0.41±0.01）、（0.09±0.03）比（1.50±0.01）］、ROCK2 mRNA［（0.89±0.09），（0.14±0.01），（0.20±0.01）比（1.62±0.17）］水平降低（ P<0.05或 P<0.01）；20、40、80 μg/ml黄芪甲苷组ROCK2蛋白［（0.75±0.06，0.57±0.02，0.66±0.01）比（1.08±0.02）］、p-MLC2蛋白［（1.72±0.03）、（1.40±0.04）、（1.29±0.03）比（2.19±0.11）］、MLC2蛋白［（1.13±0.02）、（0.68±0.03）、（0.75±0.03）比（1.60±0.03）］及40、80 μg/ml黄芪甲苷组RhoA蛋白［（0.35±0.01）、（0.40±0.03）比（0.57±0.08）］表达降低（ P<0.05或 P<0.01）。 结论:黄芪甲苷可阻止LPA诱导的神经突起回缩，促进受损神经再生，其机制可能与下调RhoA-ROCK2通路RhoA、ROCK2、p-ROCK2、p-MLC2、MLC2蛋白表达，抑制神经生长锥崩溃有关。

黄芪甲苷;神经突起回缩;RAS同源基因家族成员A;Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2;肌球蛋白轻链;N1E-115细胞

钱安妮;甘红霞;苏蕾;张朝贵;范有明

湖北民族大学医学部　风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室，恩施　445000;湖北民族大学附属民大医院神经内科，恩施　445000;重庆医科大学附属巴南医院呼吸及危重症医学科，重庆　400000

国际中医中药杂志

[1]钱安妮;甘红霞;苏蕾;张朝贵;范有明-.黄芪甲苷对小鼠神经母细胞瘤细胞神经突起回缩的影响及机制研究)[J].国际中医中药杂志,2022(12):1395-1401

神经突起回缩,N1E,MLC2

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