目的 观察龙柴方对恩替卡韦抗乙型肝炎病毒(HBV)效果的影响,并探讨可能作用机制.方法 24只SD大鼠随机分为空白组和龙柴方低、中、高剂量组,每组6只.龙柴方低、中、高剂量组大鼠分别给予龙柴方药液9.84、19.68、39.36g/(kg·d)灌胃,空白组给予和龙柴方中剂量组等量生理盐水灌胃,连续给药7天后制备含药血清.将HepG2.2.15肝癌细胞分为空白对照组(等量培养基)、空白血清组(100％空白血清∶培养基=1∶ 9)、恩替卡韦组(15 μmol/ml恩替卡韦∶培养基=1 ∶9)及恩替卡韦+龙柴方低、中、高剂量血清组(15 μmol/ml恩替卡韦∶100％龙柴方低、中、高剂量含药血清∶培养基=1 ∶1 ∶8),培养24h.MTT法检测各组细胞存活率,荧光定量PCR法测定HBVDNA表达量;ELISA法测定乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)表达量;Western blot法检测P-糖蛋白(P-gp)、蛋白激酶B(AKT)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)蛋白表达.结果 各组HepG2.2.15细胞存活率差异均无统计学意义(P＞0.05).与空白血清组比较,恩替卡韦+龙柴方中、低剂量血清组HBV DNA水平、HBeAg表达量明显降低(P＜O.01).与空白组对照比较,恩替卡韦+龙柴方中剂量血清组HBsAg表达量降低(P＜0.05).与空白血清组和恩替卡韦组比较,恩替卡韦+龙柴方低剂量血清组PI3K蛋白表达降低,恩替卡韦+龙柴方中剂量血清组PI3K、AKT、P-gp蛋白表达均降低,PTEN蛋白表达升高(P＜0.05或P＜0.01).与恩替卡韦组+龙柴方高剂量血清组比较,恩替卡韦组+龙柴方中剂量血清组HBV DNA水平降低,PTEN蛋白表达升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 龙柴方对恩替卡韦抗HBV产生增效作用,其机制可能与上调PETN蛋白,抑制PI3K/AKT信号通路,从而下调P-gp表达有关,且以中剂量效果最佳.

慢性乙型肝炎;乙型肝炎病毒;龙柴方;恩替卡韦;P-糖蛋白;PI3K/AKT信号通路

郑雪;严展鹏;李堃;徐婷婷;王培;林琳;朱方石

南京中医药大学第三临床医学院,江苏省南京市红山路十字街100号,210028;江苏省中医药研究院;江苏省中西医结合医院

中医杂志

[1]郑雪;严展鹏;李堃;徐婷婷;王培;林琳;朱方石-.龙柴方含药血清联合恩替卡韦对HepG2.2.15肝癌细胞中P-糖蛋白和PI3K/AKT信号通路的影响)[J].中医杂志,2022(23):2272-2278

龙柴方

含药血清,恩替卡韦,HepG2,肝癌细胞,糖蛋白,PI3K,AKT,抗乙型肝炎病毒,和龙,高剂量,方药,药液,36g,灌胃,等量,生理盐水,水灌,连续给药,空白对照,白血,ml,24h,MTT,细胞存活率,HBVDNA,乙型肝炎病毒表面抗原,HBsAg,HBeAg,blot,gp,蛋白激酶,磷脂酰肌醇,同源性,张力蛋白,PTEN,对照比,平降,增效作用,PETN,慢性乙型肝炎

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