目的 探讨褪黑素对氧化应激条件下的大鼠髓核间充质干细胞(NPMSCs)的影响及调节机制.方法 使用差速贴壁法获取大鼠NPMSCs.显微镜下观察细胞状态,鉴定第三代细胞三系分化潜能和细胞表面免疫标志物;采用CCK-8法检测不同浓度过氧化氢和褪黑素诱导对大鼠NPMSCs活力的影响确定最佳浓度和实验分组;免疫荧光和流式细胞学技术检测NPMSCs活性氧水平;免疫印迹分析外基质标志蛋白(Ⅱ型胶原、糖胺聚糖)和通路核心蛋白(Nrf2、HO-l)表达情况.结果 褪黑素在氧化应激下保护了 NPMSCs的活性,且1μmol/L浓度保护效应最为明显(0.717±0.018,t=7.102,P＜0.01).褪黑素可抑制NPMSCs在H202诱导后的活性氧水平(阳性率70.0％vs.32.7％).此外,褪黑素还能显著提高Nrf2/ARE信号通路中关键蛋白核因子E2相关因子(1.925±0.024,t=13.150,P＜0.01)和血红素氧合酶-1(1.605±0.019,t=12.940,P＜0.01)的活性,改善 NPMSCs 的功能.褪黑素治疗后,细胞基质蛋白Ⅱ型胶原(0.850±0.010,t=25.200,P＜0.01)和糖胺聚糖(0.335±0.013,t=10.640,P＜0.01)表达增加.结论 褪黑素通过调控Nrf2/ARE信号通路可以影响NPMSCs退变的生物学特性.

椎间盘退变;褪黑素;氧化应激;髓核间充质干细胞;活性氧

李才;许盼盼;胡捷;朱坤;叶雨辰;张亚伟;张长春

蚌埠医学院第一附属医院骨科,安徽蚌埠233004;蚌埠医学院安徽省组织移植重点实验室,安徽蚌埠233030

中华全科医学

[1]李才;许盼盼;胡捷;朱坤;叶雨辰;张亚伟;张长春-.褪黑素调控Nrf2/ARE信号通路延缓髓核间充质干细胞退变的实验研究)[J].中华全科医学,2022(11):1831-1835,1851

NPMSCs

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