目的:探讨山奈酚(KAE)对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法:将C28/I2细胞分为对照组(正常培养的C28/I2细胞)、模型组(100 ng·ml-1 LPS)、山奈酚低(KAE?L组,25μmol·L-1 KAE+100 ng·ml-1 LPS)、中(KAE?M组,50μmol·L-1 KAE+100 ng·ml-1 LPS)、高(KAE?H组,100μmol·L-1 KAE+100 ng·ml-1 LPS)剂量组.利用Lipo?fectamineTM2000转染试剂盒对C28/I2细胞进行转染,并分为:mimics NC组(转染mimics NC+100 ng·ml-1 LPS)、miR?21 mim?ics组(转染miR?21 mimics+100 ng·ml-1 LPS)、inhibitor NC组(转染inhibitor NC+100 ng·ml-1 LPS)、miR?21 inhibitor组(转染miR?21 inhibitor+100 ng·ml-1 LPS)、pcDNA组(转染pcDNA+100 ng·ml-1 LPS)、pcDNA?SOX9组(转染pcDNA?SOX9+100 ng·ml-1 LPS).另取部分mimics NC组、miR?21 mimics组C28/I2细胞,用100μmol·L-1 KAE处理,记作KAE+mimics NC组、KAE+miR?21 mimics组.采用MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT?PCR检测细胞中miR?21表达;Western Blot检测细胞中性别决定区Y框蛋白9(SOX9)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR?21与SOX9靶向关系.结果:与对照组比较,模型组C28/I2细胞中SOX9蛋白表达、细胞活力显著降低,miR?21表达、细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与模型组比较,KAE各剂量组C28/I2细胞中SOX9蛋白表达、细胞活力显著升高,miR?21表达、细胞凋亡率显著降低(P<0.05);miR?21可靶向负调控SOX9表达;抑制miR?21或上调SOX9均可促进LPS诱导的C28/I2细胞增殖,抑制细胞凋亡;miR?21过表达逆转了KAE(100μmol·L-1)对LPS诱导的C28/I2细胞增殖、凋亡的作用.结论:KAE可能通过下调miR?21表达,上调SOX9表达促进LPS诱导的C28/I2细胞增殖,抑制细胞凋亡.

山奈酚;骨关节炎;miR-21;性别决定区Y框蛋白9;细胞增殖;细胞凋亡

丘志河;谢卫勇;黄刚;廖小青;李祥

深圳市龙岗区骨科医院运动医学科 广东深圳 518116

中国药师

[1]丘志河;谢卫勇;黄刚;廖小青;李祥-.山奈酚通过调控miR?21/SOX9对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响)[J].中国药师,2022(12):2073-2078

KAE,KAE+100,fectamineTM2000,NC+100,mimics+100,inhibitor+100,pcDNA+100,SOX9+100,KAE+mimics,KAE+miR

山奈酚,骨关节炎,软骨细胞,C28,I2,ml,LPS,Lipo,转染,试剂盒,记作,MTT,细胞活力,流式细胞术,qRT,Blot,性别决定,双荧光素酶报告基因实验,细胞凋亡率,负调控,过表达

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