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丹参酮ⅡA对雷帕霉素诱导自噬M2巨噬细胞共培养的皮肤黑素瘤A375细胞EMT的影响
文献摘要：
目的 通过建立肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)自噬水平改变对与之共培养的A375细胞的体系,进一步明确TAMs自噬在调控A375细胞上皮间质转化(EMT)及迁移侵袭过程中的作用.方法 用PMA和IL-4相继作用于人单核细胞THP-172 h诱导其成M2型,流式细胞术及免疫荧光检测鉴定M2表面CD68、CD204、CD206等标志性分子表达情况,鉴定TAMs极化效率.用自噬调节剂雷帕霉素干预TAMs(M2)24 h,去除自噬调节药物的干预48 h后,通过蛋白免疫印迹方法以及免疫荧光检测各组细胞LC3-Ⅱ和Beclin-1表达,确定药物干预后的TAMs自噬水平.将雷帕霉素干预后的TAMs与人黑素瘤A375细胞进行非接触共培养,48 h后加入不同浓度TanⅡA 1 mg/L(低浓度)组、4 mg/L(高浓度)组,继续培养48 h后,Western blot检测A375细胞EMT相关因子的表达,并通过transwell检测A375细胞的侵袭和迁移能力.结果 人单核细胞THP-1经PMA和IL-4先后作用共72 h后,细胞状态由半悬浮变为贴壁,经流式细胞术、免疫荧光检测发现M2表面CD68、CD204、CD206的表达较M0组明显增强,差异具有统计学意义(均P<0.05).用自噬调节剂雷帕霉素干预TAMs 24 h后,免疫荧光、Western blot检测显示,LC3-Ⅱ及Beclin-1的表达明显上调,差异具有统计学意义(均P<0.05).TAMs和A375细胞非接触共培养48 h后,不同浓度的TanⅡA作用于细胞,Western Blot检测显示,相对于空白组,TanⅡA低浓度组和高浓度组Beclin1、LC3-Ⅱ和E-cadherin蛋白表达均显著升高,N-cadherin蛋白表达均显著降低,组间差异均具有统计学意义(均P<0.05).transwell实验显示,TanⅡA低浓度组和TanⅡA高浓度组处理后的A375细胞,其迁移、侵袭能力均有所下降,组间差异具有统计学意义(均P<0.05).结论 雷帕霉素可以诱导TAMs发生自噬,TanⅡA可以抑制自噬TAMs与之共培养的黑素瘤A375细胞的EMT过程,从而抑制其侵袭和转移.
文献关键词：
TAMs;自噬;皮肤黑素瘤;丹参酮ⅡA;EMT
中图分类号：
作者姓名：
韩昭;高艳玲;李志锋;张建忠;张伶;刘钊;徐艳艳;李小静
作者机构：
河北工程大学附属医院皮肤科,河北 邯郸 056002;邯郸市中心医院急诊科,河北 邯郸 056002
文献出处：
引用格式：
[1]韩昭;高艳玲;李志锋;张建忠;张伶;刘钊;徐艳艳;李小静-.丹参酮ⅡA对雷帕霉素诱导自噬M2巨噬细胞共培养的皮肤黑素瘤A375细胞EMT的影响)[J].皮肤性病诊疗学杂志,2022(04):291-298
A类：
CD204
B类：
丹参酮,雷帕霉素,自噬,M2,细胞共培养,皮肤黑素瘤,A375,EMT,肿瘤相关巨噬细胞,TAMs,细胞上皮间质转化,迁移侵袭,PMA,人单核细胞,THP,流式细胞术,免疫荧光检测,检测鉴定,CD68,CD206,调节剂,蛋白免疫印迹,LC3,药物干预,非接触,Tan,blot,相关因子,transwell,侵袭和迁移,迁移能力,细胞状,贴壁,M0,明显增强,Blot,Beclin1,cadherin,侵袭能力,侵袭和转移
AB值：
0.210967
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