典型文献
Spink5基因条件性敲除小鼠模型的构建及表型分析
文献摘要：
目的:构建Spink5基因条件性敲除小鼠模型并鉴定其表型。方法:采用CRISPR/Cas9技术构建基因型为Mb1
cre/+Spink5
floxp/floxp的B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠（敲除组），以基因型为Mb1
+/+Spink5
floxp/floxp的小鼠为对照组。提取小鼠脾脏单个核细胞并经流式细胞荧光技术分选B淋巴细胞及非B淋巴细胞，然后分别进行基因型鉴定及淋巴上皮Kazal型抑制物（LEKTI）蛋白表达的测定。切取小鼠皮肤行HE染色，测量表皮厚度，免疫荧光染色测定小鼠皮肤LEKTI蛋白荧光强度。组间比较采用配对
t检验或两独立样本
t检验。
结果:基因型鉴定结果表明，成功构建稳定的B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠模型。Western印迹显示，条件性敲除小鼠B淋巴细胞中LEKTI蛋白相对表达量为0.01 ± 0.02，显著低于非B淋巴细胞（0.66 ± 0.11，
t = 9.99，
P < 0.001）及对照组小鼠B淋巴细胞（1.08 ± 0.13，
t = 13.78，
P < 0.001）。39只敲除组小鼠中，4只出现皮肤干燥、散在鳞屑性肥厚型斑丘疹。敲除组皮损部位表皮厚度为（90.42 ± 21.31）μm，显著高于其非皮损部位[（29.71 ± 3.63）μm，
t = 5.05，
P = 0.002]及对照组表皮[（12.42 ± 2.21）μm，
t = 6.74，
P < 0.001]。免疫荧光检测显示，敲除组皮损处LEKTI蛋白荧光强度为46.21 ± 1.21，非皮损处为46.62 ± 2.13，与对照组（47.69 ± 1.71）差异均无统计学意义（
P > 0.05）。
结论:成功构建了B淋巴细胞Spink5基因条件性敲除小鼠模型，为进一步探究Netherton综合征皮肤屏障缺陷伴免疫功能异常的机制提供研究基础。
文献关键词：
Netherton综合征;小鼠，基因敲除;B淋巴细胞;Spink5基因;LEKTI蛋白;皮肤屏障受损
中图分类号：
作者姓名：
阎诗;周小英;罗晓燕;任发亮;江为;牛琳琳;王华;白晓明
作者机构：
重庆医科大学附属儿童医院皮肤科 儿童感染免疫重庆市重点实验室 国家儿童健康与疾病临床医学研究中心 儿童发育疾病研究教育部重点实验室，重庆 400014
文献出处：
引用格式：
[1]阎诗;周小英;罗晓燕;任发亮;江为;牛琳琳;王华;白晓明-.Spink5基因条件性敲除小鼠模型的构建及表型分析)[J].中华皮肤科杂志,2022(02):95-101
A类：
Spink5,Mb1
,+Spink5
,floxp,LEKTI
B类：
条件性敲除,敲除小鼠,小鼠模型,表型分析,CRISPR,Cas9,技术构建,cre,脾脏,单个核细胞,分选,基因型鉴定,Kazal,抑制物,小鼠皮肤,HE,皮厚,免疫荧光染色,荧光强度,白相,相对表达量,皮肤干燥,鳞屑,肥厚型,丘疹,皮损,免疫荧光检测,Netherton,免疫功能异常,基因敲除,皮肤屏障受损
AB值：
0.183808
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