目的:探讨核苷酸结合寡聚结构域1(nucleotide-binding oligomerization domain 1,NOD1)对甲状腺癌细胞BPCPA生物学行为的影响及其调控机制.方法:通过siRNA技术干扰甲状腺癌细胞株BPCPA中NOD1的表达水平,转染空载体质粒NC-siRNA的细胞命名为siNC组,转染NOD1干扰质粒NOD1-siRNA的细胞命名为siNOD1组.采用qRT-PCR和Western blot验证干扰效果;采用EdU增殖实验检测NOD1表达下调后细胞增殖的变化;流式细胞术检测NOD1表达下调后细胞周期和凋亡的变化;细胞划痕实验检测NOD1表达下调后细胞运动能力的变化;Tran-swell实验检测NOD1表达下调后细胞侵袭能力的变化;Western blot检测干扰NOD1对MAPK信号通路的影响.结果:转染NOD1-siRNA后,siNOD1组细胞中NOD1的mRNA和蛋白表达水平较siNC组明显下降(0.194±0.059 vs 1.00±0.000,t=19.220,P<0.001;0.073±0.020 vs 0.352±0.040,t=8.852,P<0.001);siNOD1组细胞的EdU阳性率高于siNC组(76.41％±3.75％vs 28.75％±3.79％,t=4.751,P<0.001);相较于siNC组细胞,siNOD1组G1期细胞比例下降(66.23％ ±4.28％vs 55.38％ ±3.11％,t=2.902,P=0.044),S期和G2/M期细胞比例增加(22.41％±2.87％vs 36.00％±3.49％,t=4.249,P=0.013;6.84％±0.50％vs 10.92％±1.08％,t=4.859,P=0.010);siNOD1组和siNC组细胞的凋亡率差异无统计学意义(8.47％±0.61％vs 8.74％±1.03％,t=0.322,P=0.763);siNOD1组细胞划痕愈合距离显著多于siNC组[(609.33±41.11)μm vs(316.63±24.05)μm,t=8.691,P=0.001];siNOD1组侵袭细胞数量为(545.3±24.5)个,显著多于siNC组(392.3±17.6)个(t=5.060,P=0.007);si-NOD1组细胞的P38和ERK磷酸化水平较siNC组高(1.196±0.045 vs 0.357±0.030,t=21.961,P<0.001;0.764±0.039 vs 0.219±0.038,t=14.265,P<0.001).结论:NOD1通过MAPK信号通路抑制甲状腺癌细胞BPCPA的增殖和转移,可能是甲状腺癌潜在的治疗靶点.

NOD1;甲状腺癌;增殖;迁移;侵袭;MAPK通路

白宁;刘春燕;李颖;张晓乐;侯德强

214000 江苏 无锡,江南大学附属医院 内分泌科;214000 江苏 无锡,江南大学附属医院 口腔科

肿瘤预防与治疗

[1]白宁;刘春燕;李颖;张晓乐;侯德强-.NOD1对甲状腺癌细胞BPCPA恶性生物学功能的影响及机制)[J].肿瘤预防与治疗,2022(07):590-597

BPCPA,siNOD1

甲状腺癌细胞,生物学功能,寡聚,聚结,结构域,nucleotide,binding,oligomerization,domain,生物学行为,调控机制,siRNA,细胞株,转染,空载,质粒,siNC,qRT,blot,干扰效果,EdU,实验检测,流式细胞术,细胞周期,细胞划痕实验,细胞运动,运动能力,Tran,swell,细胞侵袭能力,MAPK,蛋白表达水平,G1,G2,凋亡率,细胞数量,P38,ERK,磷酸化,治疗靶点

0.207961