目的 探讨改良二乙基亚硝胺(DEN)给药法诱导大鼠肝细胞肝癌(HCC)模型及常规超声联合血清甲胎蛋白(AFP)评估HCC模型的可行性.方法 将175只无特定病原体级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照组(n=8)、对照组(n=69)和模型组(n=98).对照组大鼠给予单一剂量DEN(50 mg·kg-1)腹腔注射制备HCC模型.模型组大鼠采用改良DEN给药法诱导大鼠HCC,即根据体质量变化动态调整DEN给药剂量:初始剂量50 mg·kg-1,然后每周根据体质量变化调整给药剂量,若大鼠体质量未下降或下降幅度小于每周5 g时,按50 mg·kg-1给药;若每周大鼠体质量下降5～20 g,按25 mg·kg-1给药;若大鼠体质量下降超过每周20 g,暂停给药1周.空白对照组大鼠腹腔注射等量的生理盐水.第1～4周每周给药2次,第5～15周每周给药1次,连续给药15周.造模完成后,记录并比较造模期间3组大鼠死亡率;对存活大鼠行肝脏超声、血清AFP水平检查.随机抽取空白对照组7只大鼠、对照组14只大鼠和模型组14只大鼠,麻醉后处死并解剖,观察肝脏成瘤情况,记录肝脏质量并计算肝脏指数,苏木精-伊红染色观察大鼠肝脏病理学变化.结果 造模期间,空白对照组、对照组、模型组大鼠死亡率分别为0.0％(0/8)、34.8％(24/69)、19.4％(19/98);对照组大鼠死亡率显著高于空白对照组(χ2=4.043,P<0.05),模型组与空白对照组大鼠死亡率比较差异无统计学意义(χ2=1.890,P>0.05),模型组大鼠死亡率显著低于对照组(χ2=5.019,P<0.05).空白对照组大鼠均未见癌结节或肝硬化表现,超声影像正常.对照组30只、模型组48只大鼠肝脏可见癌结节,癌结节超声检出率分别为66.7％(30/45)、60.8％(48/79);对照组与模型组大鼠的肝脏癌结节超声检出率比较差异无统计学意义(χ2=0.278,P>0.05).对照组与模型组大鼠血清AFP水平显著高于空白对照组(t=0.728、0.771,P<0.05);对照组与模型组大鼠血清AFP水平比较差异无统计学意义(t=0.043,P>0.05).超声对肝脏癌结节诊断的敏感度为62.9％(78/124),血清AFP对肝脏癌结节诊断的敏感度为58.1％(50/86),血清AFP联合超声对肝脏癌结节诊断的敏感度为87.2％(73/86).超声与血清AFP对肝脏癌结节诊断的敏感度比较差异无统计学意义(χ2=1.014,P>0.05);血清AFP联合超声检查对肝脏癌结节诊断的敏感度显著高于超声和血清AFP单独检测(χ2=35.342、21.271,P<0.05).空白对照组大鼠肝脏均表面光滑,颜色红润细腻,未见结节;对照组和模型组大鼠肝脏增大,质地变硬,弥漫着大小不等的癌结节,部分癌结节伴出血坏死.对照组和模型组大鼠体质量显著低于空白对照组,肝质量、肝脏指数显著高于空白对照组(P<0.05);对照组和模型组大鼠体质量、肝质量、肝脏指数比较差异无统计学意义(P>0.05).空白对照组大鼠肝小叶结构清晰,肝细胞索排列整齐,细胞核明显,未见水肿及炎症细胞浸润;对照组和模型组大鼠肝小叶结构不完整,出现假小叶,癌细胞排列成巢状,可见纤维组织增生,部分区域可见局灶性的细胞坏死,癌细胞核大、深染,偶见双核或多核,具有明显的细胞异形性,部分肿瘤细胞侵犯血管.2组大鼠的成瘤率均为100.0％.结论 根据体质量变化动态调整DEN给药剂量诱导HCC大鼠模型,既可保证成瘤率又可降低造模过程中大鼠死亡率,肝脏超声联合血清AFP检测可作为评估大鼠HCC模型的方法.

肝细胞肝癌;二乙基亚硝胺;超声成像;甲胎蛋白

苏天琳;王中会;晁旭;樊莹莹;黄峰;杨兵社

陕西中医药大学医学技术学院,陕西 西安 712046;陕西中医药大学基础医学院,陕西 西安 712046;陕西中医药大学第二附属医院科研科,陕西 咸阳 712000;陕西中医药大学第二附属医院超声科,陕西 咸阳712000

新乡医学院学报

[1]苏天琳;王中会;晁旭;樊莹莹;黄峰;杨兵社-.常规超声联合血清甲胎蛋白评估改良二乙基亚硝胺给药法诱导大鼠肝细胞肝癌模型的可行性)[J].新乡医学院学报,2022(08):708-714

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