目的:观察miR-143-3p对脂多糖(LPS)诱导的牙周膜细胞(hPDLCs)炎症反应和凋亡的影响,并探究其作用机制.方法:原代培养hPDLCs细胞,LPS处理三代hPDLCs细胞建立炎症模型设为模型组,正常培养的细胞设为对照组.脂质体法将antagomiRNA组(转染antagomiRNA)、antagomiR-143-3p组(转染 antagomiR-143-3p)、pcDNA 组(转染 pcDNA)、pcDNA-SIRT2 组(转染 pcDNA-SIRT2)、an-tagomiR-143-3p+si-NC 组(共转染 antagomiR-143-3p和si-NC)、antagomiR-143-3p+si-SIRT2组(共转染antagomiR-143-3p和si-SIRT2)转染至hPDLCs细胞,再用LPS(1 μg/mL)处理.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-143-3p、SIRT2、NL-RP3、Caspase-1的表达;蛋白免疫印迹(WB)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞SIRT2蛋白及上清肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素1 β(IL-1 β)含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因检测试验检测细胞荧光强度.结果:与对照组相比,模型组细胞TNF α、IL-1 β,细胞凋亡率均升高,细胞活性降低(P＜0.05).miR-143-3p在模型组细胞中的表达显著高于对照组(P＜0.05).抑制miR-143-3p则 NLRP3、Caspase-1的mRNA表达、TNF α、IL-1 β的含量及细胞凋亡率均明显降低(P＜0.05).miR-143-3p靶向负调控SIRT2的表达.SIRT2在模型组细胞中低表达,且过表达SIRT2具有与抑制miR-143-3p相似的作用.敲减SIRT2部分逆转抑制miR-143-3p对模型细胞的抗炎、抗凋亡作用.结论:miR-143-3p在LPS诱导的hPDLCs细胞中高表达,抑制miR-143-3p能减轻LPS诱导的hPDLCs细胞的炎症和凋亡,其潜在的机制可能与靶向SIRT2有关.

miR-143-3p;SIRT2;牙周炎;炎症反应;凋亡

河南省直第三人民医院口腔科 郑州 450000

[1]刘沛;王清芝-.miR-143-3p通过SIRT2调控LPS诱导牙周膜细胞炎症、凋亡的研究)[J].口腔颌面修复学杂志,2022(03):176-182

antagomiRNA,tagomiR

SIRT2,LPS,牙周膜细胞,细胞炎症,脂多糖,hPDLCs,原代培养,炎症模型,脂质体法,pcDNA,3p+si,NC,共转染,噻唑蓝,MTT,细胞活性,反转录聚合酶链式反应,qPCR,Caspase,蛋白免疫印迹,WB,酶联免疫吸附试验,白及,上清,流式细胞术,细胞凋亡率,双荧光素酶报告基因,基因检测,检测试验,试验检测,荧光强度,NLRP3,负调控,低表达,过表达,敲减,抗凋亡,凋亡作用,牙周炎

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