目的 探讨高糖培养的人肾小管细胞HK-2中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)CTB-92J24.3对miR-135b-5p表达的调控机制及对肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响.方法 以高糖(25 mmol/L葡萄糖)培养人肾小管细胞HK-2,采用慢病毒过表达技术上调HK-2细胞中CTB-92J24.3的表达作为CTB-92J24.3组,以空载慢病毒感染为control组.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测两组HK-2细胞中CTB-92J24.3的表达差异.MTT法检测两组HK-2细胞的增殖活性.流式细胞术实验检测两组HK-2细胞的凋亡率.采用miRcode软件预测CTB-92J24.3作用结合的微小RNA(miRNA).采用双荧光素酶报告基因实验验证CTB-92J24.3和下游miRNA之间的结合.qRT-PCR分别检测下游miRNA和miRNA靶基因的表达.Western blot检测miRNA靶基因蛋白、促增殖相关蛋白(CDK2、Cyclin E)及促凋亡相关蛋白(Bax、Bak)的表达.结果 与control组相比,CTB-92J24.3组HK-2细胞中CTB-92J24.3表达显著增加(P<0.01),HK-2细胞增殖活性显著升高(P<0.05),HK-2细胞凋亡显著降低(P<0.01).CTB-92J24.3的靶基因是miR-135b-5p,两者能够互补结合(P<0.01).与control组相比,CTB-92J24.3组HK-2细胞中miR-135b-5p表达降低(P<0.01),miR-135b-5p的靶基因骨成型蛋白7(bone morphogenic protein 7,BMP7)基因表达明显增加(P<0.01).与control组相比,CTB-92J24.3组HK-2细胞中BMP7、CDK2、Cyclin E表达增加(P<0.01),Bax、Bak蛋白表达降低(P<0.01).结论 CTB-92J24.3能够抑制高糖培养的肾小管上皮细胞HK-2中miR-135b-5p的表达水平,上调BMP7基因的表达,促进肾小管上皮细胞的增殖并抑制其凋亡.

肾小管上皮细胞;CTB-92J24.3;miR-135b-5p;增殖;凋亡

沈旭;刘俊;李建新;曾龙;高云;王思佳

荆门市第二人民医院,荆楚理工学院附属中心医院泌尿外科,荆门 448000;荆门市第二人民医院,荆楚理工学院附属中心医院感染科

山西医科大学学报

[1]沈旭;刘俊;李建新;曾龙;高云;王思佳-.长链非编码RNA CTB-92J24.3通过调控miR-135b-5p表达对高糖条件下肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响)[J].山西医科大学学报,2022(05):578-583

92J24

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