目的 探讨长链非编码RNA抑制因子活化T细胞(lncRNA NRON)对miR-185-5p的调控作用及其影响乳腺癌细胞增殖、凋亡及化疗耐药性的基因调控机制.方法 2020年8月—2021年12月于陆军军医大学大坪医院中心实验室进行实验.选取2016年7月—2020年7月于医院乳腺甲状腺外科行手术切除的乳腺癌患者26例的癌组织及癌旁组织样本,体外培养正常乳腺上皮细胞系(MCF10A)及乳腺癌细胞系(MCF7、MDA-231、T47D、SKBR3、ZR7530、BT549、HCC1937、BT474).qRT-PCR法检测lncRNA NRON、miR-185-5p基因表达;双荧光素酶试验验证lncRNA NRON与miR-185-5p的靶向关系.将MCF7乳腺癌细胞分为阴性对照(NC)组、plasmid NRON组(转染lncRNA NRON过表达载体)、plasmid NRON+mimic NC组(转染plasmid NRON+mimic NC)、plasmid NRON+miR-185-5p mimic组(转染plasmid NRON+miR-185-5p模拟物),分别给予5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)、紫杉醇(PTX)培养,CCK-8法检测细胞增殖情况(OD值)、半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(R),流式细胞术检测细胞凋亡,Western-blot法检测胸苷酸合成酶(TS)表达,裸鼠荷瘤实验验证化疗效果(瘤体体积、ki67表达).结果 乳腺癌组织中lncRNA NRON表达低于癌旁组织,miR-185-5p表达高于癌旁组织(P<0.05);乳腺癌细胞系中lncRNA NRON表达低于正常乳腺上皮细胞系,miR-185-5p表达高于正常乳腺上皮细胞系(P<0.05).与NC组比较,plasmid NRON组MCF7细胞对5-FU、DDP、PTX的IC50及R值降低(P<0.01);OD值降低,凋亡率及TS表达升高(P<0.01);裸鼠瘤体体积、ki67表达降低(P<0.01).双荧光素酶试验显示,lncRNA NRON与miR-185-5p之间有靶向结合关系,lncRNA NRON可靶向下调miR-185-5p表达.与plasmid NRON组比较,plasmid NRON+miR-185-5p mimic组裸鼠瘤体体积升高(P<0.05),TS蛋白降低(P<0.05);而plasmid NRON组与plasmid NRON+mimic NC组比较上述指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 lncRNA NRON可通过靶向下调miR-185-5p降低乳腺癌细胞对化疗药物的耐药性.

乳腺癌;长链非编码RNA抑制因子活化T细胞;微小RNA-185-5p;化疗耐药性

400042 重庆,陆军军医大学大坪医院乳腺甲状腺外科

[1]汪伶俐;田武国;赵健洁;罗东林-.lncRNA NRON靶向miR-185-5 p调节乳腺癌细胞化疗耐药性的机制研究)[J].疑难病杂志,2022(10):1088-1095

NRON,ZR7530,NRON+mimic,NRON+miR

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