典型文献
肿瘤坏死因子-α通过激活Wnt/β-catenin通路增加肺微血管内皮屏障通透性
文献摘要：
目的 探讨炎症环境下Wnt/β-catenin通路对肺微血管内皮屏障通透性的影响.方法 分别用浓度为0、25、50、100、200 ng·mL-1的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)处理人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMVECs)24 h,采用CCK-8检测细胞存活率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测闭合蛋白-5(claudin-5)、闭锁小带蛋白1(zonula occludens 1,ZO-1)的表达,选取TNF-α最佳干预浓度.将细胞分为control组、TNF-α100 ng·mL-1组、Wnt通路抑制对照组(XAV-NC组)、Wnt通路抑制组(XAV组),应用Wnt/β-catenin通路抑制剂XAV-939(10μmol·L-1,24 h)后,采用CCK-8法检测细胞存活率,细胞划痕实验检测细胞迁移,FITC-葡聚糖检测微血管内皮屏障通透性,RT-qPCR和蛋白免疫印迹(Western blot)测定各实验组β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、claudin-5、ZO-1的表达.结果 随TNF-α浓度增加,HPMVECs存活率逐渐降低,claudin-5、ZO-1 mRNA表达逐渐减少(P均<0.05),筛选出TNF-α作用的最适剂量为100 ng·mL-1.应用XAV-939后,与control组相比,TNF-α100 ng·mL-1组细胞存活率及迁移率降低,Transwell小室通过FITC-葡聚糖增多,屏障相对通透性系数增大,β-catenin及Cyclin D1表达增加,claudin-5、ZO-1的表达减少(P均<0.05);与XAV-NC组比,XAV组细胞存活率及迁移率增加,Transwell小室通过FITC-葡聚糖减少,屏障相对通透性系数减小,β-catenin及Cyclin D1表达减少,claudin-5、ZO-1的表达增加(P均<0.05).结论 TNF-α可通过激活Wnt/β-catenin通路,使紧密连接蛋白claudin-5、ZO-1的表达减少,增加肺微血管内皮屏障通透性.
文献关键词：
Wnt/β-catenin通路;肿瘤坏死因子-α;肺微血管内皮屏障;闭合蛋白-5;闭锁小带蛋白1
中图分类号：
作者姓名：
吴彦立;周文杰;马希刚
作者机构：
宁夏医科大学临床医学院,银川 750004;宁夏医科大学总医院重症医学科,银川 750004
文献出处：
引用格式：
[1]吴彦立;周文杰;马希刚-.肿瘤坏死因子-α通过激活Wnt/β-catenin通路增加肺微血管内皮屏障通透性)[J].宁夏医科大学学报,2022(03):239-245,266
A类：
肺微血管内皮屏障,HPMVECs
B类：
Wnt,catenin,通透性,炎症环境,tumor,necrosis,人肺微血管内皮细胞,human,pulmonary,microvascular,endothelial,cells,CCK,细胞存活率,qPCR,闭合蛋白,claudin,闭锁,zonula,occludens,ZO,control,XAV,NC,通路抑制剂,细胞划痕实验,实验检测,细胞迁移,FITC,葡聚糖,蛋白免疫印迹,blot,连环蛋白,细胞周期蛋白,D1,Cyclin,最适剂量,迁移率,Transwell,小室,紧密连接蛋白
AB值：
0.201422
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