典型文献
利用CRISPR/Cas9建立RBBP4低表达的HepG2,LO2稳定细胞系
文献摘要：
目的 利用CRISPR/Cas9在肝癌细胞HepG2及正常肝组织细胞(LO2)中敲低RBBP4?eGFP报告基因,构建RBBP4低表达的HepG2及LO2稳定细胞系.方法 基于CRISPR/Cas9系统原理,设计靶向细胞RBBP4基因第1个外显子的小向导RNA(sgRNA),构建具有左右同源臂和P2A-eGFP供体质粒的干扰质粒;将测序鉴定正确的重组质粒分别转染至HepG2及LO2细胞中,通过嘌呤霉素筛选细胞系,提取RNA和蛋白,分别通过QPCR和蛋白质印迹分析检测RBBP4敲低对细胞系的影响.结果 QPCR及和蛋白质印迹分析结果提示筛选的HepG2及LO2细胞系中RBBP4基因及蛋白表达减低(P<0.05).结论 通过CRISPR/Cas9系统成功构建了RBBP4稳定敲低的HepG2及LO2细胞系.
文献关键词：
视网膜母细胞瘤结合蛋白4;CRISPR/Cas9;系统HepG2细胞;LO2细胞
中图分类号：
作者姓名：
杨丽丽;黄常新;李永强;王聪洁;沈靖;陈艺丹;张嗣玉
作者机构：
310000 杭州师范大学附属医院;311399 临安市人民医院;311121 杭州市余杭区二院;310005 杭州市肿瘤医院
文献出处：
引用格式：
[1]杨丽丽;黄常新;李永强;王聪洁;沈靖;陈艺丹;张嗣玉-.利用CRISPR/Cas9建立RBBP4低表达的HepG2,LO2稳定细胞系)[J].浙江临床医学,2022(12):1742-1744
A类：
RBBP4
B类：
CRISPR,Cas9,低表达,HepG2,LO2,稳定细胞系,肝癌细胞,肝组织,组织细胞,敲低,eGFP,报告基因,系统原理,外显子,向导,sgRNA,P2A,供体,重组质粒,转染,嘌呤霉素,QPCR,蛋白质印迹,分析检测,减低,视网膜母细胞瘤,结合蛋白
AB值：
0.273341
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