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CRISPR/Cas9敲除HBV pre S1段对肝癌细胞中HBV病毒复制的影响
文献摘要：
目的 探讨CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除HBVpre S1段对肝癌细胞中HBV病毒复制的影响,分析基因编辑联合传统抗病毒药物或免疫调节剂的抗病毒疗效.方法 根据HBVpre S1段设计特异性干扰片段gR NA(sgR NA-1、sgR NA-2及sgR NA-3)接入表达载体进行转化,经DAPI染色鉴定转染、获得HBV pre S1敲除的HepAD38细胞;采用马酸替诺福韦(TDF)和干扰素-α(IFN-α)处理HBV pre S1敲除的HepAD38细胞,取上清液、采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAg、HBcrAg的含量,RT-PCR方法检测HBV DNA、pgRNA水平.结果 成功构建HBVgRNA,sgRNA-3作用最强;成功获得HBVpre S1敲除的HepAD38细胞,Cas9/sgRNA定位于细胞核;与对照组细胞比较,HBV pre S1敲除的HepAD38细胞HBV复制水平降低(P<0.05),TDF或IFN-α处理HBV pre S1敲除的HepAD38细胞能有效增强抗病毒效应(P<0.05),且IFN-α处理的细胞更能抑制HBV RNA和HBsAg的分泌.结论 Cas9/sgRNA靶向HBV DNA切割能抑制HBV病毒的复制,传统抗病毒药物或免疫调节剂能使该作用增强.
文献关键词：
乙型肝炎病毒;抗病毒治疗;CRISPER/Cas9;病毒复制;临床治愈;基因编辑
中图分类号：
作者姓名：
龙黎;罗新华;张茜
作者机构：
贵州省人民医院 感染科,贵州 贵阳 550002
文献出处：
引用格式：
[1]龙黎;罗新华;张茜-.CRISPR/Cas9敲除HBV pre S1段对肝癌细胞中HBV病毒复制的影响)[J].贵州医科大学学报,2022(10):1163-1168,1188
A类：
HBVpre,gR,sgR,HBVgRNA
B类：
CRISPR,Cas9,敲除,S1,肝癌细胞,病毒复制,基因编辑技术,抗病毒药物,免疫调节剂,表达载体,DAPI,转染,HepAD38,替诺福韦,TDF,干扰素,IFN,上清液,酶联免疫吸附实验,HBsAg,HBcrAg,pgRNA,sgRNA,细胞核,复制水平,平降,毒效应,乙型肝炎病毒,抗病毒治疗,CRISPER,临床治愈
AB值：
0.220568
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