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分泌型蛋白在沙眼衣原体活动性感染中的诊断价值
文献摘要：
目的 探讨分泌型蛋白在沙眼衣原体(Ct)活动性感染中的诊断价值.方法 通过基因工程方法筛选目的分泌型蛋白,构建重组质粒,转化至表达宿主菌中进行诱导表达,利用Western-Blot分析和鉴定表达产物.以纯化的重组蛋白作为包被抗原,建立其血清学诊断的间接ELISA法,并用已有的IgG试剂盒与其共同检测Ct感染血清标本,评价二者敏感度与特异性,分析该抗血清在临床标本抗原检测中的应用价值.结果 经1.5％琼脂糖凝胶电泳,目的基因Pgp3在对应的位置上(大小约564 bp)可见清晰的条带,与预期片段一致.pET30a/Pgp3经表达引物扩增,在对应的位置上(大小约792 bp)可见清晰的条带,经NdeⅠ和HindⅢ双酶切,得到大小约为792 bp的清晰条带.pET30a/Pgp3表达蛋白的诱导剂IPTG温度为10℃,浓度为0.6 mmol/L出现相应的蛋白条带最粗.阴性血清中无重组蛋白的表达,阳性血清有一条反应较弱的明显条带,抗HIS标签有一个明显的清晰条带.阳性标本中,重组蛋白Pgp3的敏感度为86.21％(50/58),特异度为93.83％(152/162),与Ct IgG试剂盒符合率为91.82％[(50+152)/220],两种检测结果比较,差异无统计学意义(χ2=0.056,P=0.814).结论 纯化的Ct重组蛋白Pgp3具有较好的免疫原性,以Pgp3蛋白建立的间接ELISA法的具有较好的特异性和敏感度,且与商品Ct Ig G ELISA试剂盒检测结果符合率高,可能有望作为Ct活动期感染的血清学诊断的候选抗原.
文献关键词：
分泌型蛋白;Pgp3;沙眼衣原体;活动性感染;诊断价值
中图分类号：
作者姓名：
袁红霞;龙歆孜;陈虹亮;周安文;蔡友香;罗丽裴
作者机构：
湖南郴州市第一人民医院检验科,湖南,郴州423000;湖南株洲市疾病控制中心检验科,湖南,株洲412000;湖南郴州市第一人民医院烧伤科,湖南,郴州423000
文献出处：
引用格式：
[1]袁红霞;龙歆孜;陈虹亮;周安文;蔡友香;罗丽裴-.分泌型蛋白在沙眼衣原体活动性感染中的诊断价值)[J].分子诊断与治疗杂志,2022(07):1089-1093
A类：
Pgp3,50+152
B类：
分泌型蛋白,沙眼衣原体,活动性感染,诊断价值,Ct,基因工程,选目,重组质粒,宿主菌,诱导表达,Blot,达产,重组蛋白,包被抗原,血清学诊断,IgG,试剂盒,血清标本,抗血清,临床标本,抗原检测,琼脂糖凝胶电泳,目的基因,bp,条带,pET30a,引物,Nde,Hind,双酶,诱导剂,IPTG,白条,阳性血清,HIS,签有,阳性标本,符合率,结果比较,免疫原性,活动期,候选抗原
AB值：
0.290864
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