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塞拉菌素促进人结肠癌细胞自噬体积累抑制其增殖的研究
文献摘要：
目的 研究塞拉菌素(Sela)对人结肠癌细胞SW480自噬的影响及蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的调控作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测Sela对SW480细胞的半抑制浓度IC50;克隆形成方法检测Sela对SW480细胞的长期增殖能力抑制作用;Sela与不同死亡抑制剂、自噬抑制剂联合处理作用于SW480细胞,MTT法检测Sela对SW480细胞活力的影响;pEGFP-LC3质粒及pmCherry-EGFP-LC3串联质粒转染SW480细胞,荧光显微镜观察检测Sela诱导下自噬体和自噬溶酶体的形成情况;蛋白质印迹技术测定自噬相关蛋白LC3、p62以及Akt/mTOR通路相关蛋白的表达情况.结果 与对照组相比,Sela处理后SW480细胞活力明显下降,且呈浓度依赖性,IC50为18.3μmol/L;克隆形成实验结果表明,与对照组相比,Sela处理对SW480细胞增殖具有长效抑制作用,差异有统计学意义(P<0.001);随着Sela作用浓度的升高,SW480细胞内的LC3-Ⅱ和p62含量均逐渐上升,自噬体不断累积及自噬溶酶体形成减少;自噬抑制剂Wortmanin与Sela联合处理,减少了LC3-Ⅱ的转换,明显恢复了Sela对SW480细胞的生长抑制作用;而羟氯喹则增加了SW480细胞内LC3-Ⅱ的累积,明显加剧了Sela对SW480细胞的生长抑制.Sela作用后,SW480细胞中p-Akt,p-mTOR以及下游p-p70S6k的蛋白表达量明显下调.结论 Sela具有抑制结肠癌SW480细胞的作用,其潜在作用机制可能与抑制Akt/mTOR信号通路从而诱发SW480细胞内自噬体的积累有关.
文献关键词：
塞拉菌素;蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路;自噬;结肠癌
中图分类号：
作者姓名：
潘江;乔坤;程琳
作者机构：
成都医学院 生物科学与技术学院,成都 610500
文献出处：
引用格式：
[1]潘江;乔坤;程琳-.塞拉菌素促进人结肠癌细胞自噬体积累抑制其增殖的研究)[J].成都医学院学报,2022(06):696-701
A类：
塞拉菌素,Sela,Wortmanin,p70S6k
B类：
人结肠癌细胞,细胞自噬,自噬体,SW480,蛋白激酶,Akt,mTOR,偶氮,氮唑,比色法,MTT,半抑制浓度,IC50,克隆形成,自噬抑制剂,联合处理,细胞活力,pEGFP,LC3,pmCherry,质粒转染,荧光显微镜观察,下自,自噬溶酶体,蛋白质印迹技术,自噬相关蛋白,p62,浓度依赖性,生长抑制,羟氯喹,潜在作用,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路
AB值：
0.161015
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