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扁蒴藤素对人结直肠癌细胞HCT116和HT29增殖、迁移和细胞周期的影响及作用机制研究
文献摘要:
目的 探讨扁蒴藤素对人结直肠癌HCT116细胞和HT29细胞增殖、迁移和细胞周期的影响,并初步探索潜在的分子机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)实验于不同时点分别检测不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞存活率的影响;采用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)实验分别检测不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞增殖能力的影响;采用Transwell实验观察不同浓度扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞迁移能力的影响;采用流式细胞术检测扁蒴藤素对HCT116细胞和HT29细胞周期的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测扁蒴藤素对HCT116细胞与HT29细胞周期相关蛋白cyclin E1、CDK2、p53、p21、p27表达和PI3K/Akt/mTOR信号转导通路相关蛋白表达的影响.结果 MTT实验结果显示,经不同浓度扁蒴藤素分别处理12、24、36、48、60 h后,HCT116细胞和HT29细胞的存活率均较对照细胞降低,且呈时间和浓度依赖性.EdU实验结果显示,经0.5、1、2 μmol/L扁蒴藤素处理24h后,HCT116细胞中阳性细胞率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);经1、2、4 μmol/L扁蒴藤素处理24h后,HT29细胞中阳性细胞率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001).Transwell实验结果显示,加入0.5、1、2 μmol/L扁蒴藤素作用24 h后,HCT116细胞穿透小室底膜的数量变少,且细胞迁移率低于对照细胞,差异有统计学意义(P<0.001);加入1、2、4 μmol/L扁蒴藤素作用24 h后,HT29细胞穿透小室底膜的数量变少,且细胞迁移率低于对照细胞,差异有统计学意义(P<0.001).流式细胞术结果显示,扁蒴藤素可诱导HCT116细胞和HT29细胞发生G0/G1 期阻滞.Western blot结果显示,与对照细胞比较,HCT116细胞和HT29细胞经扁蒴藤素处理后p53、p21、p27蛋白表达量增加,cyclin E1、CDK2蛋白表达量降低,且p-PI3K、p-Akt、mTOR和p-mTOR蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001).结论 扁蒴藤素可抑制HCT116细胞和HT29细胞的增殖和迁移,并诱导细胞G0/G1期阻滞,其分子机制可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.
文献关键词:
扁蒴藤素;结直肠癌;增殖;迁移;细胞周期;信号通路
中图分类号:
作者姓名:
吕蒙莹;罗照勇;王维民;梁巧玲;王杨;钱亚云;刘延庆
作者机构:
扬州大学医学院/转化医学研究院,江苏扬州,225001;国家中医药管理局胃癌毒邪论治重点研究室,江苏扬州,225001
文献出处:
引用格式:
[1]吕蒙莹;罗照勇;王维民;梁巧玲;王杨;钱亚云;刘延庆-.扁蒴藤素对人结直肠癌细胞HCT116和HT29增殖、迁移和细胞周期的影响及作用机制研究)[J].实用临床医药杂志,2022(13):60-67
A类:
扁蒴藤素
B类:
结直肠癌细胞,HCT116,HT29,细胞周期,影响及作用,初步探索,噻唑蓝,MTT,时点,细胞存活率,乙炔基,脱氧尿苷,EdU,细胞增殖能力,Transwell,实验观察,细胞迁移能力,流式细胞术,蛋白质印迹法,blot,cyclin,E1,CDK2,p53,p21,p27,PI3K,Akt,mTOR,信号转导通路,别处,浓度依赖性,素处理,24h,中阳,阳性细胞,小室,变少,细胞迁移率,G0,G1,可抑制,细胞的增殖,增殖和迁移
AB值:
0.192214
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