目的 探讨肿瘤蛋白翻译控制1的反义RNA 1(TPT1-AS1)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和作用机制.方法 收集于2017年1月至2018年12月在信阳市中心医院心胸外科行手术治疗的46例肺癌组织和对应的癌旁组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测组织中TPT1-AS1和微小RNA-671-5p(miR-671-5p)表达,Pearson相关性分析肺癌组织中TPT1-AS1和miR-671-5p表达的相关性.同时,于2019年5月至2020年4月期间,通过体外培养肺癌细胞A549,双荧光素酶报告基因实验验证了细胞中TPT1-AS1和miR-671-5p调控关系.另将A549细胞分为对照组、小干扰RNA阴性序列(si-NC)组、TPT1-AS1小干扰RNA(si-TPT1-AS1)组、si-TPT1-AS1+抑制剂阴性序列(anti-miR-NC)组和si-TPT1-AS1+miR-671-5p抑制剂(anti-miR-671-5p)组,甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹实验检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达.结果 肺癌组织中TPT1-AS1表达量较癌旁组织显著升高[(1.88±0.12)比(1.01±0.08),P<0.05],miR-671-5p表达量较癌旁组织显著降低[(0.45±0.04)比(1.01±0.06),P<0.05].Pearson相关性分析显示,肺癌组织中TPT1-AS1和miR-671-5p呈负相关(r=?0.63,P<0.05).TPT1-AS1在A549细胞中负调控miR-671-5p表达.si-TPT1-AS1组A549细胞存活率、迁移数和侵袭数分别为(53.24±2.81)％、(63.11±6.51)个和(33.78±3.23)个,均低于si-NC组[分别为(98.78±2.57)％、(147.44±11.08)个和(101.67±9.95)个,均P<0.05].CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白在si-TPT1-AS1组的表达量分别为(0.43±0.05)、(0.21±0.03)、(0.43±0.04),较si-NC组均降低[分别为(0.86±0.04)、(0.55±0.05)、(0.48±0.07),均P<0.05].si-TPT1-AS1+anti-miR-671-5p组A549细胞存活率、迁移数和侵袭数及CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达分别为(85.43±2.94)％、(125.78±10.59)个、(88.78±7.19)个、(0.75±0.03)、(0.48±0.03)、(0.43±0.04),较si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组均升高[分别为(54.36±2.95)％、(63.78±6.48)个、(33.56±3.54)个、(0.41±0.03)、(0.22±0.03)、(0.21±0.04),均P<0.05].对照组与si-NC组、si-TPT1-AS1组与si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组各检测指标比较均差异无统计学意义(P>0.05).结论 肺癌组织中TPT1-AS1表达升高,miR-671-5p表达降低,且两者呈负相关.TPT1-AS1可能通过靶向下调miR-671-5p的表达促进肺癌细胞增殖、迁移和侵袭.

肺肿瘤;肿瘤蛋白翻译控制1的反义RNA 1;微小RNA-671-5p;细胞增殖;迁移;侵袭

张龙;王瑞;赵佳

信阳市中心医院心胸外科,河南 信阳464000

安徽医药

[1]张龙;王瑞;赵佳-.肿瘤蛋白翻译控制1的反义RNA 1在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响)[J].安徽医药,2022(04):718-723,后插2

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