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MDA-PCR检测痕量结核分枝杆菌核酸方法的建立
文献摘要：
目的 建立基于多重置换扩增及PCR(MDA-PCR)技术检测痕量结核分枝杆菌(M.tb)核酸的方法.方法 制备含有M.tb插入序列IS6110和IS1081的不同稀释浓度的质粒DNA标准品.MDA-PCR分别通过检测质粒DNA标准品和其他细菌标准株基因组DNA来验证该方法的敏感度及特异性.另外,通过对模拟结核性脑膜炎(TBM)患者脑脊液(CSF)标本检测,评价该方法检测临床标本的可行性.结果 MDA-PCR方法对质粒DNA标准品IS6110、IS1081基因的最低检测下限分别为10、25拷贝,其检测敏感度是ST-PCR方法的40～100倍.另外,该方法对5种其他细菌标准株基因组DNA的检测结果均为阴性,无非特异性反应发生.MDA-PCR对模拟TBM患者CSF中M.tb IS6110及IS1081基因的最低检测下限均为1CFU,其检测敏感度是ST-PCR的104～105倍.结论 MDA-PCR方法可提高对CSF中痕量M.tb核酸的检测效率,为TBM早期诊断提供了 一种新的研究策略.
文献关键词：
多重置换扩增;PCR;结核性脑膜炎;脑脊液
中图分类号：
作者姓名：
周林甫;万群;赵钢;张红鸭
作者机构：
西北大学医学院,陕西西安710068;空军军医大学西京医院神经内科,陕西西安710032;深圳大学总医院神经内科,广东深圳518055
文献出处：
引用格式：
[1]周林甫;万群;赵钢;张红鸭-.MDA-PCR检测痕量结核分枝杆菌核酸方法的建立)[J].广东医学,2022(06):702-706
A类：
多重置换扩增,IS6110,IS1081,1CFU
B类：
痕量,结核分枝杆菌,菌核,tb,插入序列,稀释浓度,质粒,标准品,标准株,结核性脑膜炎,TBM,脑脊液,CSF,临床标本,对质,检测下限,拷贝,ST,无非,非特异性,检测效率,研究策略
AB值：
0.203434
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