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典型文献
环纹奥斯特线虫PCR-ELISA快速检测方法的建立
文献摘要:
[目的]建立高效、快速、灵敏、特异、准确的环纹奥斯特线虫检测方法.[方法]根据GenBank已发表的奥斯特线虫ITS-2的基因序列,对该上下游引物的5′端分别标记地高辛和生物素,按照PCR-ELISA的操作步骤对所用链霉亲和素的包被浓度、BSA封闭液的封闭浓度、PCR产物的作用时间、酶标二抗的工作稀释浓度以及作用时间、显色时间等进行优化,进而确定反应的最佳条件;以环纹奥斯特线虫、东方毛圆线虫、捻转血矛线虫、羊仰口线虫、甘肃食道口线虫的DNA为模板,在最佳反应条件下进行PCR-ELISA检测其特异性;批内和批间重复性试验检测其稳定性.[结果]建立的环纹奥斯特线虫PCR-ELISA快速检测方法的敏感性比常规PCR高10倍,和其他线虫无交叉反应,特异性强,变异系数小于10%,稳定性好.[结论]建立的高效、快速、特异、安全的Ostertagia circumcincta间隔区ITS-2检测方法,可以为进一步研制用于Ostertagia circumcincta的流行病学调查、诊断试剂提供技术支撑.
文献关键词:
环纹奥斯特线虫;PCR;PCR-ELISA
作者姓名:
李永光;文育胜;刘雯雯;赵涛;魏芳;祁光宇
作者机构:
甘肃农业大学应用技术学院,甘肃 定西 730500;甘肃省定西市临洮农业学校,甘肃 定西 730500;中农威特生物科技股份有限公司,甘肃 兰州 730046
引用格式:
[1]李永光;文育胜;刘雯雯;赵涛;魏芳;祁光宇-.环纹奥斯特线虫PCR-ELISA快速检测方法的建立)[J].甘肃农业大学学报,2022(05):138-146
A类:
环纹奥斯特线虫,Ostertagia,circumcincta
B类:
快速检测方法,GenBank,ITS,基因序列,上下游,引物,地高辛,生物素,操作步骤,包被,BSA,封闭液,作用时间,稀释浓度,显色,最佳条件,捻转血矛线虫,食道,道口,反应条件,重复性试验,试验检测,交叉反应,流行病学调查,诊断试剂
AB值:
0.212322
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