典型文献
基于微流控技术的磁免疫荧光法在EB病毒检测中的应用
文献摘要:
EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)的早期诊断能够降低患者发生重大疾病的风险.临床上常用的EBV抗体的检测方法存在耗时长、试剂消耗大和效率低等缺点.相比于传统的检测方法,微流控(microfluidics)技术具有高通量、试剂消耗少,污染少和自动化程度高等优点,磁免疫荧光技术具有检测效率高、信号强等优点,将两者的优势结合,能够弥补传统方法的不足.鉴于此,采用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)作为芯片原材料,经过激光切割及真空热压加工工艺能够快速获得芯片.将包被抗原的磁珠及包被抗人抗体的荧光微球经过冷冻干燥工艺快速冻干成小球并嵌入芯片内,经过孵育和清洗后,进行检测.通过图像分析快速得到检测结果.通过精密度、特异性、剂量-反应曲线及检出限测试,进行性能验证.通过与化学发光免疫分析法(CLIA)检测的临床样本比对,进行方法学与临床应用评价.结果显示相对标准偏差(RSD)均小于10%.与多种常见的病原体抗体均无交叉反应.EB病毒衣壳抗原(Epstein-Barr viral capsid antigen,EB VCA)IgG项目的检出限为1.92 U/mL,线性范围为1.92~200 U/mL,阳性符合率为95.77%(68/71),阴性符合率为86%(43/50);EB VCA IgA项目的检出限为2.79 U/mL,线性范围为2.79~200 U/mL,阳性符合率为92%(46/50),阴性符合率为92.96%(66/71);EB病毒核心抗原1(Epstein-Barr nuclear antigen 1,EB NA1)IgG项目的检出限为3.13 U/mL,线性范围为3.13~200 U/mL,阳性符合率为92.96%(66/71),阴性符合率为92%(46/50);EB NA1 IgA项目的检出限为1.53 U/mL,线性范围为1.53~200 U/mL,阳性符合率为90%(45/50),阴性符合率为91.55%(65/71).4个项目能在20 min内快速完成检测,且与临床上使用CLIA方法测试的结果具有良好的相关性,可以为临床提供一种快速、灵敏、简便、自动化程度高和易于基层推广的检测方法.
文献关键词:
微流控;磁免疫荧光;EB病毒;快速检测
中图分类号:
作者姓名:
李俊豪;韩冠华;林晓涛;吴力强;钱纯亘;徐军发
作者机构:
广东医科大学医学技术学院检验医学研究所临床免疫学教研室,广东东莞 523808;深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司,广东深圳 518100
文献出处:
引用格式:
[1]李俊豪;韩冠华;林晓涛;吴力强;钱纯亘;徐军发-.基于微流控技术的磁免疫荧光法在EB病毒检测中的应用)[J].色谱,2022(04):372-383
A类:
磁免疫荧光
B类:
微流控技术,免疫荧光法,病毒检测,Epstein,Barr,virus,EBV,重大疾病,microfluidics,免疫荧光技术,检测效率,聚甲基丙烯酸甲酯,PMMA,激光切割,真空热压,加工工艺,艺能,包被抗原,磁珠,荧光微球,过冷,冷冻干燥,干燥工艺,速冻,成小球,孵育,洗后,图像分析,精密度,检出限,性能验证,化学发光免疫分析法,CLIA,临床样本,方法学,临床应用评价,相对标准偏差,RSD,病原体,交叉反应,衣壳,viral,capsid,antigen,VCA,IgG,线性范围,符合率,IgA,核心抗原,nuclear,NA1,和易,基层推广,快速检测
AB值:
0.331405
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