目的 建立肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)感染Nod2基因肝组织条件敲除小鼠模型,初步探究Nod2基因在K.pneumoniae感染引起肝脓肿过程中的作用及机制.方法 将引进的Nod2 flox/+小鼠自交获得Nod2 flox/flox小鼠,同时将Alb-Cre+小鼠与Nod2 flox/+进行杂交获得Nod2 flox/+;Alb-Cre+的子代小鼠;将上述两种基因型的子代小鼠进行杂交,获得Nod2基因肝脏条件性敲除小鼠(Nod2 flox/flox;Alb-Cre+)和同窝阴性对照组小鼠(Nod2 flox/flox).提取小鼠脚趾基因组DNA,经PCR扩增,通过琼脂糖凝胶电泳鉴定子代小鼠基因型并提取小鼠肝脏,利用RT-qPCR和Western blot验证Nod2基因在肝脏中的敲除效果.实验组和对照组小鼠分别感染K.pneumoniae,观察不同时间点小鼠生存率及肝组织病理变化;利用RT-qPCR检测实验组和对照组小鼠感染K.pneu-moniae 48 h后肝组织内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和趋化因子CXC配体1(CXCL1)的mRNA的表达水平.结果 Nod2flox/flox;Alb-Cre+小鼠肝脏NOD2 mRNA表达量降低(P<0.05),Western blot结果显示NOD2蛋白表达量降低;与对照组小鼠比较,实验组小鼠在感染K.pneumoniae后生存率降低(中位生存时间60.5 h,P=0.0469),肝组织出现了更为严重的病理损伤;实验组小鼠肝组织中TNF-α、IL-1β和CXCL1的mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NOD2在K.pneumoni-ae感染诱导肝脓肿的过程中起保护作用.

肺炎克雷伯菌肝脓肿;Nod2基因;炎症反应;保护作用

孟宝;伍婷;苏丛;孙雅婷;唐明洋;郭明娟;兰燕虎;李家斌

安徽医科大学第一附属医院 感染病科,合肥 230022;安徽医科大学第一附属医院 感染管理科,合肥 230022;安徽省细菌耐药性监控中心,合肥 230022;安徽医科大学细菌耐药研究所,合肥230022;安徽医科大学附属巢湖医院感染病科,巢湖 238000

安徽医科大学学报

[1]孟宝;伍婷;苏丛;孙雅婷;唐明洋;郭明娟;兰燕虎;李家斌-.Nod2基因在肺炎克雷伯菌肝脓肿中的作用研究)[J].安徽医科大学学报,2022(09):1380-1384

Nod2,Nod2flox,pneumoni

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