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典型文献
P2Y14基因敲除小鼠的构建及免疫功能初探
文献摘要:
为探讨嘌呤能受体P2Y,G蛋白偶联,14(purinergic receptor P2Y,G-protein coupled,14,P2Y14)在免疫和炎症反应中的作用,采用CRISPR/Cas9技术构建P2Y14基因敲除(P2Y14 knockout,P2Y14 KO)小鼠,采用PCR和测序方法鉴定子代小鼠的基因型,评估小鼠的生长发育状况;FACS检测小鼠胸腺和脾脏T、B细胞及其亚群的百分比;实时荧光定量PCR法和ELISA检测LPS作用下野生型(wild type,WT)组和 P2Y14KO组小鼠腹腔渗出巨噬细胞(peritoneal exudative macrophage,PEM)炎症相关因子的mRNA和蛋白水平变化.结果显示,该方法成功构建得P2Y14 KO小鼠;与WT小鼠相比,P2Y14 KO小鼠的体质量以及肝、脾、肾脏质量和组织形态结构无明显差异,但胸腺质量显著增加(P<0.01),胸腺CD3+、CD8+T细胞百分比显著增加(P<0.05,P<0.01),脾脏淋巴细胞及其亚群无明显差异.LPS刺激条件下,P2Y14 KO小鼠PEM中炎性因子IL-6和趋化因子CCL2在mRNA和蛋白水平上与WT小鼠相比显著降低(有P<0.01,P<0.001).以上结果表明,该研究成功构建了 P2Y14KO小鼠并发现该基因缺失可促进胸腺中T细胞的分化和发育,同时显著减少PEM炎性因子的释放.
文献关键词:
嘌呤能受体P2Y;G蛋白偶联;14基因;基因敲除;CRISPR/Cas9;免疫反应;炎性因子
作者姓名:
卢秉霖;秦居亮;车安然;钱春梅;岑玉蓉;杜冰;王秦
作者机构:
安徽理工大学 医学院,淮南 232001;华东师范大学生命科学学院,上海 200241;上海市奉贤区中心医院肾脏风湿科,上海 201406
文献出处:
引用格式:
[1]卢秉霖;秦居亮;车安然;钱春梅;岑玉蓉;杜冰;王秦-.P2Y14基因敲除小鼠的构建及免疫功能初探)[J].现代免疫学,2022(06):466-473
A类:
P2Y14,P2Y14KO
B类:
基因敲除小鼠,嘌呤能受体,偶联,purinergic,receptor,protein,coupled,CRISPR,Cas9,技术构建,knockout,定子,子代,基因型,生长发育状况,FACS,胸腺,亚群,LPS,下野,野生型,wild,type,WT,小鼠腹腔,渗出,巨噬细胞,peritoneal,exudative,macrophage,PEM,炎症相关因子,水平变化,肾脏质量,组织形态,形态结构,CD3+,CD8+T,脾脏淋巴细胞,炎性因子,趋化因子,CCL2,基因缺失,细胞的分化,免疫反应
AB值:
0.32187
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