目的:探究小檗碱(BBR)对过氧化氢(H2O2)诱导的巨噬细胞焦亡的影响及mtROS-NLRP3通路在其中的调控作用.方法:以巨噬细胞J774A.1为研究对象,设置正常对照组(control组)、模型组(H2O2作用24 h)、BBR干预组(H2O2+BBR作用24 h)和ROS清除剂NAC干预组(H2O2+NAC作用24 h).流式细胞术检测各组细胞活性氧簇(ROS)的生成,免疫荧光检测ROS与线粒体的共定位情况,实时荧光定量PCR检测各组细胞NLRP3、IL-1β的基因转录水平,Western blot检测NLRP3蛋白表达量,流式细胞术检测caspase-1的活化及其介导的细胞焦亡率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞LDH的释放量,ELISA检测IL-1β分泌水平.结果:与模型组相比,BBR干预后显著减少了H2O2诱导的巨噬细胞线粒体ROS(mtROS)的生成,下调了NLRP3和IL-1β的基因表达水平,减少了NLRP3蛋白的表达,降低了caspase-1活化水平及其介导的细胞焦亡率,同时减少了细胞上清液中LDH和IL-1β的释放.结论:小檗碱可能通过下调mtROS水平进而抑制NLRP3炎症体介导的细胞焦亡以减轻炎症反应.

小檗碱;巨噬细胞;氧化应激;细胞焦亡;mtROS-NLRP3通路

苏日娜;刘天怡;马璐瑶;刘梦华;周娜;郝钰

北京中医药大学生命科学学院免疫与微生物学系,北京102488

中国免疫学杂志

[1]苏日娜;刘天怡;马璐瑶;刘梦华;周娜;郝钰-.小檗碱通过mtROS-NLRP3通路抑制H2O2诱导的巨噬细胞焦亡)[J].中国免疫学杂志,2022(09):1064-1068

H2O2+BBR,H2O2+NAC

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