目的 初步探讨巨噬细胞中毛状样蛋白1(COTL1)敲低对炎症反应的影响及可能的分子机制.方法 构建特异性敲低COTL1慢病毒载体,转染RAW264.7细胞,同时加脂多糖(LPS)刺激诱导炎症反应细胞模型.通过Western印迹和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别在蛋白和mRNA水平检测RAW264.7细胞中COTL1敲低效果;Western印迹检测LPS刺激RAW264.7细胞中细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基端激酶(JNK)和核因子κB抑制因子激酶(IKK)的磷酸化水平;Western印迹检测LPS刺激COTL1敲低的RAW264.7细胞中ERK、JNK和IKK磷酸化水平的变化;一氧化氮(NO)检测试剂盒检测LPS诱导的一氧化氮的分泌;酶联免疫吸附法(ELISA)检测LPS刺激COTL1敲低的RAW264.7细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6的分泌.结果 RAW264.7细胞中敲低COTL1可在一定程度上抵抗LPS等外界刺激导致的JNK、NF-κB炎症信号通路的激活,减少下游炎症细胞因子和活性氮的表达,继而减轻整体的炎症反应.结论 巨噬细胞中COTL1敲低通过减少JNK、NF-κB通路的激活和下游炎症细胞因子的分泌、NO的生成继而减轻炎症反应.

巨噬细胞;毛状样蛋白1;炎症;敲低表达;脂多糖

王玮;刘煜慧;姜颖

军事科学院军事医学研究院生命组学研究所,国家蛋白质科学中心(北京),蛋白质组学国家重点实验室,北京 102206

军事医学

[1]王玮;刘煜慧;姜颖-.巨噬细胞中毛状样蛋白1敲低减轻脂多糖诱导的炎症反应)[J].军事医学,2022(07):511-517

COTL1

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