为探讨神经丝轻链(neurofilament light chain,NEFL)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达情况及作用机制,本研究首先对食管鳞癌组织及配对的正常食管上皮中NEFL的mRNA和蛋白表达情况进行了检测.基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)RNA表达数据,以及临床标本的实时荧光定量逆转录–聚合酶链式反应(real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)分析结果显示,与正常食管上皮组织相比,食管鳞癌组织中NEFL基因mRNA水平明显升高.Western blot分析结果显示,与正常食管上皮组织相比,食管鳞癌组织中NEFL蛋白水平也明显升高.进一步采用CCK8法和Transwell法检测NEFL过表达对食管鳞癌细胞恶性表型的影响,结果显示敲降NEFL后,食管鳞癌细胞的侵袭和迁移能力显著减弱.体内裸鼠成瘤实验显示,敲降NEFL可显著抑制肿瘤生长.分子水平检测表明,敲降NEFL显著升高上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达并降低N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达、下游分子表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的mRNA和蛋白的表达水平,蛋白激酶B(protein kinase B,PKB;又被称为AKT)和核糖体蛋白S6(ribosomal protein S6)的磷酸化水平也显著降低.敲降NEFL后转染EGFR过表达载体,AKT和S6的磷酸化水平以及食管鳞癌细胞侵袭和迁移表型都得以恢复.以上研究结果表明,NEFL过表达可能通过激活EGFR/AKT/S6信号通路促进食管鳞癌细胞EMT,最终促进食管鳞癌细胞的侵袭迁移.

NEFL;食管鳞癌;侵袭迁移;EGFR;上皮间质转化

范志露;杨荔艳;张娜;冯丹;郭静;常晨;苑青;蔡岩;张钰;魏文强;王明荣;郝佳洁

国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心,中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院,分子肿瘤学国家重点实验室,北京 100021;国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心,中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科,北京 100021;国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心,中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院流行病学中心,北京 100021

遗传

[1]范志露;杨荔艳;张娜;冯丹;郭静;常晨;苑青;蔡岩;张钰;魏文强;王明荣;郝佳洁-.NEFL通过激活EGFR/AKT/S6信号通路促进食管鳞癌细胞的侵袭迁移)[J].遗传,2022(04):322-334

NEFL

EGFR,AKT,S6,进食,食管鳞癌细胞,侵袭迁移,轻链,neurofilament,light,chain,esophageal,squamous,cell,carcinoma,ESCC,癌组织,基因表达综合数据库,Gene,Expression,Omnibus,GEO,临床标本,逆转录,聚合酶链式反应,real,quantitative,reverse,transcription,qRT,上皮组织,blot,CCK8,Transwell,恶性表型,迁移能力,裸鼠,成瘤,肿瘤生长,分子水平,水平检测,上皮间质转化,epithelial,mesenchymal,transition,EMT,钙黏蛋白,cadherin,表皮生长因子受体,epidermal,growth,receptor,蛋白激酶,protein,kinase,PKB,核糖体蛋白,ribosomal,磷酸化,转染,过表达载体,癌细胞侵袭,细胞侵袭和迁移

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