目的 探究白藜芦醇(RES)逆转胶质瘤细胞替莫唑胺(TMZ)耐药的作用是否与通过溴结合域蛋白4(BRD4)调控Wnt/β-链蛋白(β-catenin)通路有关.方法 取人神经胶质瘤TMZ低敏细胞株(U138)、高敏细胞株(U251)、耐药株(T98G),Western blot法检测3种细胞株中BRD4、Wnt3a、β-catenin、TMZ耐药蛋白(MGMT)蛋白表达.取T98G细胞株分为对照1组(添加100μmoL/L TMZ)、RES1组(添加50μmoL/L RES)、RES+TMZ(添加100μmoL/L TMZ和50μmoL/L RES)组,用CCK-8法、流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡情况;Western blot法检测各组BRD4、Wnt3a、β-catenin、MGMT蛋白表达.为分析BRD4过表达对TMZ耐药性的影响,在添加100μmoL/L TMZ的基础上,转染BRD4过表达质粒(pcDNA BRD4)或加入50μmoL/L RES分别作为pcDNA NC组、pcDNA BRD4组、RES2组、RES+pcDNA BRD4组.为验证BRD4对Wnt3a/β-catenin通路的调控作用,在添加100μmoL/L TMZ的基础上,加入BRD4抑制剂JQ1和Wnt3a/β-catenin通路激活剂LiCl,分为对照2组、JQ1组、JQ1+LiCl组.将T98G细胞接种于裸鼠左肩胛区,给予RES、TMZ和(或)JQ1治疗,检测瘤体中Ki67,BRD4、MGMT及Wnt3a/β-catenin蛋白表达.结果 与U251细胞相比,U138、T98G中BRD4、Wnt3a、β-catenin及MGMT表达均依次升高(P<0.05).与对照1组相比,RES干预可抑制T98G细胞BRD4、Wnt3a/β-catenin、MGMT蛋白表达及增殖,促进凋亡,逆转细胞的耐药性(P<0.05).pcDNA BRD4可逆转RES的抗增殖、促凋亡等上述作用.BRD4抑制剂JQ1可抑制T98G细胞BRD4、Wnt3a/β-catenin、MGMT蛋白表达及增殖,促进凋亡(P<0.05);LiCl可逆转JQ1的抗增殖、促凋亡作用.RES单独或与JQ1联合治疗,可激活TMZ对瘤体内Wnt3a/β-catenin通路、MGMT表达和细胞增殖的抑制作用(P<0.05).结论 RES可能通过下调BRD4,进而抑制Wnt3a/β-catenin通路活化,实现对胶质瘤T98G细胞TMZ耐药性的逆转.

神经胶质瘤;抗药性;肿瘤;Wnt信号通路;β连环素;白藜芦醇;替莫唑胺;溴结合域蛋白4

河南大学淮河医院神经外科 475000

[1]李振江;孙德超;孔晨旭;耿亚东;徐晨阳;丁炳谦-.白藜芦醇通过BRD4调控Wnt/β-catenin通路逆转胶质瘤细胞替莫唑胺耐药的机制研究)[J].天津医药,2022(10):1043-1050

U138,RES1,RES+TMZ,RES2,RES+pcDNA,JQ1+LiCl

白藜芦醇通过,BRD4,catenin,胶质瘤细胞,替莫唑胺,人神,神经胶质瘤,细胞株,U251,T98G,blot,Wnt3a,耐药蛋白,MGMT,moL,CCK,流式细胞术,耐药性,转染,过表达质粒,NC,激活剂,裸鼠,肩胛,瘤体,Ki67,均依,可抑制,抗增殖,促凋亡,述作,凋亡作用,联合治疗,可激活,抗药性,连环

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