目的 建立一种高灵敏度的高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),分析绝经后妇女血清中包含雌酮(E1)、雌二醇(E2)及其羟基化、甲基化、葡萄糖醛酸结合/硫酸结合(-G/S)等代谢产物的水平.方法 采用叔丁基甲醚液-液萃取法,结合β-葡萄糖醛酸苷酶/芳基硫酸酯酶水解及丹磺酰氯对萃取后的血清样品进行衍生化处理.以同位素标记的雌酮-d4作为内标,采用 Waters UPLC Ⅰ-Class/Xevo TQS 液质联用系统测定.以 ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)为色谱柱,水/甲醇(含0.05％甲酸和2 mmol/L甲酸铵)为流动相,0.3 mL/min流速梯度洗脱.柱温为50℃,进样量10μL.电喷雾离子源(ESI)正离子模式下扫描,多重反应监测(MRM)下测定,分析时间7 min.结果 各类雌激素定量下限低至1～2 pg/mL,平均加标回收率在90.3％～111.3％之间.绝经后妇女血清各类雌激素总量远高于临床常规雌激素指标E2的水平,并以E1-G/S和16α-羟基雌酮结合型(160HE1-G/S)水平相对较高.各类雌激素-G/S结合型水平均不低于其游离型水平.2-羟化和16-羟化通路为优势代谢通路.结论 该方法灵敏度高、分析时间短、特异性强,可用于临床绝经后妇女血清样本中微量雌激素及代谢物的定量分析.

雌激素;高效液相色谱-串联质谱法;雌酮;雌二醇;绝经

南京大学医学院附属鼓楼医院药学部,南京210008;南京市妇幼保健院妇科内分泌科,南京210001;南京品生医疗科技有限公司研发中心技术部,南京210032

[1]杨娜;陈捷;李美娟;葛佳佳;张潇莉;王敏;朱怀军;成晓亮;顾林;葛卫红-.高效液相色谱-串联质谱法在检测绝经后妇女血清中雌激素及其代谢物中的应用)[J].临床检验杂志,2022(10):756-762

160HE1

串联质谱法,绝经后妇女,雌激素,代谢物,高灵敏度,雌酮,雌二醇,E2,羟基化,甲基化,葡萄糖醛酸,代谢产物,叔丁基,甲醚,萃取法,芳基硫酸酯酶,酶水解,丹磺酰氯,衍生化,生化处理,同位素标记,d4,内标,Waters,UPLC,Class,Xevo,TQS,液质联用,联用系统,统测,ACQUITY,BEH,C18,色谱柱,甲酸铵,流动相,流速梯度,梯度洗脱,柱温,进样量,电喷雾离子源,ESI,正离子模式,多重反应监测,MRM,分析时间,下限,pg,加标回收率,激素指标,羟化,代谢通路,灵敏度高,血清样本

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