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利用CRISPR/Cas9系统定向编辑黑腹果蝇Osiris24基因
文献摘要：
Osiris基因在几丁质沉积过程中表达,可能参与昆虫表皮的发育.本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对Osiris24基因进行编辑,进而观察Osiris24突变体果蝇的性状并且检测Osiris24的表达特征.在Osiris24第1外显子设计2个sgRNA靶位点,插入到pCFD4敲除载体骨架中,同时构建酵母Ga14蛋白序列的供体(donor)载体,将2个载体同时注射到nos-Cas9胚胎中获得G0代转基因果蝇.结果显示,G0代基因编辑阳性率为92.8％,Osiris24纯合突变体在胚胎或1龄幼虫期致死,杂合突变体未观察到可见表型.将阳性G0代雄虫与UAS-GFP雌虫杂交,检测不同龄期和不同组织GFP信号表达情况.结果发现,Osiris24在不同龄期幼虫中均有表达,幼虫期主要在体壁、气管、前肠和后肠高表达,蛹期主要在体壁和翅上表达,推测其在果蝇发育中发挥重要作用,本研究为深入探究Osiris基因功能提供了研究模型.
文献关键词：
果蝇;Osiris24;CRISPR/Cas9;基因编辑;表皮
中图分类号：
作者姓名：
董玮;宋晨阳;张婷婷;武丽仙;张徐波
作者机构：
山西大学应用生物学研究所,太原030032;广东省科学院动物研究所,广州510260
文献出处：
引用格式：
[1]董玮;宋晨阳;张婷婷;武丽仙;张徐波-.利用CRISPR/Cas9系统定向编辑黑腹果蝇Osiris24基因)[J].中国生物化学与分子生物学报,2022(09):1252-1258
A类：
Osiris24,Osiris,pCFD4,Ga14
B类：
CRISPR,Cas9,黑腹果蝇,几丁质,沉积过程,昆虫,研究利用,基因编辑,突变体,表达特征,外显子,sgRNA,靶位,敲除载体,体骨,酵母,供体,donor,射到,nos,G0,代转,转基因,纯合突变,幼虫,杂合突变,UAS,GFP,不同龄期,不同组织,体壁,后肠,蛹期,基因功能,研究模型
AB值：
0.315667
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